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上海语纯生物科技有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 货号 | CC96147 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：CC96147
产品规格：10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
MG1655感受态
产品简介
MG1655 菌株来源于 W1485，是 K12 的衍生菌株，是一种经过较少改造、比较接近于“野生型"的大
肠杆菌工程菌株。MG1655 外观形态标准，既可做为扩增大肠杆菌野生型基因的模板使用，也可作
为蛋白表达的宿主菌株使用；但该菌株不含核酸酶 endA1 突变，因此体内核酸酶含量较高：提取质
粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液处理，以尽量去除核酸酶，否则提取的质粒很容易被
降解。经 pUC18 质粒转化检测，MG1655 感受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
MG1655
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：K12 F- λ- ilvGrfb-50 rph-1
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
MG1655感受态
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