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供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10^5 |
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货号 | BH3517 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号:BH3517
产品规格:5×10^5
本产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
人毛乳头细胞
人毛乳头细胞分离自皮肤组织;毛乳头是一个可诱导毛囊生长、调控毛囊发育和周期性生长的结构,由细胞外基质及成纤维细胞构成,几乎整个被毛囊下部的上皮基质包绕。毛乳头在毛囊的形态学发生和毛囊周期性生长调控中起主导作用。在毛囊的下端,毛发基质由上皮细胞组成,这些细胞被真皮鞘及真皮乳头包裹,进入到不同的分化程序,形成外毛根鞘、内毛根鞘及毛干。体外培养毛乳头细胞形态呈细长梭形,聚集、卷曲呈长条状。
本公司生产的人毛乳头细胞采用胰蛋白酶和胶原酶混合消化制备而来,细胞总量约为5×105cells,细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。培养基信息:
培养基内容:基础培养基、FBS、Penicillin、Streptomycin等
为保证细胞体外培养最佳状态我们推荐使用人毛乳头细胞专用培养基作为体外培养人毛乳头细胞专用培养基。
使用方法
在技术部标准操作流程下,人毛乳头细胞可传3-5代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
一、客户收到细胞操作如下
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态;
2. 观察细胞生长情况,细胞密度低于80%时,贴壁细胞倒去瓶中培养液,留下8ml作用继续培养;细胞密度大于80%时,即可进行传代;
3. 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS洗涤3次;
4. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴2-3min左右;倒置显微镜下观察细胞回缩变圆,透亮时即可终止消化,加入双倍培养液轻轻吹打细胞使其变成单细胞悬液;
5. 收集细胞悬液至离心管内,1000rpm离心5min,观察细胞沉淀;
6. 加入1ml的培养液,轻轻吹打成单细胞悬液,均匀分配至细胞培养瓶中,初次传代建议按照1:2比例进行
7. 待细胞贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的培养基。
二、细胞冻存管复苏
1. 提前室温预热培养基,将水浴锅调至37℃;
2. 在超净工作台内提前准备好15ml离心管,并加入5ml的培养基;
3. 将冻存管快速放入水浴锅中,不断晃动冻存管,直至管内冰块全部融化
4. 然后快速取出,喷洒酒精,转移至超净工作台;
5. 拧开冻存管螺纹盖,用移液枪将细胞悬液轻轻吸出,转移至含5ml培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
6. 离心结束后,观察有无细胞沉淀,将上清弃去,加入1ml新鲜的培养基,用移液枪轻轻吹打成细胞悬液;将细胞悬液转移至T25培养瓶中,T25培养瓶建议培养基加入量5-7ml,轻轻晃动培养瓶使细胞分散均匀,置于培养箱中培养。
三、细胞冻存
1. 冻存条件:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO或者无血清冻存液
2. 保存条件:液氮存储
人毛乳头细胞