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服務(wù)介紹:
細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖,是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。細(xì)胞增值檢測(cè)有PI、Ki67、MTT和CCK-8等多種方法,里來(lái)生物為您提供細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
MTT 比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在492nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收光值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。
服務(wù)項(xiàng)目 | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
---|---|---|
MTT檢測(cè) | 元/板 | ¥500.00 |
備注:不含細(xì)胞株和受檢藥物。4個(gè)復(fù)孔(共60孔可以用,但要除去調(diào)零組、對(duì)照組,即藥物組最多可設(shè)置13組),實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,出具簽字蓋章實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
操作流程:
① 收集對(duì)數(shù)期細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞懸液濃度3×104~5×104個(gè)/mL;
② 96孔加入細(xì)胞懸液,100 μl/孔,邊緣用PBS填充,5% CO2、37℃孵育;
③ 培養(yǎng)24 h后給藥,設(shè)置3~6個(gè)復(fù)孔,5% CO2、37℃孵育;
④ 孵育適當(dāng)時(shí)間后,棄舊液,用無(wú)血清培養(yǎng)基與CCK8按照10:1稀釋200 μl/孔/無(wú)血清培養(yǎng)基與MTT按照9:1稀釋,200 μl/孔,繼續(xù)培養(yǎng)至所需時(shí)間點(diǎn);
⑤ MTT:時(shí)間到后,小心吸去孔內(nèi)培養(yǎng)液,每孔加入150 μl二甲基亞砜,置搖床上低速振蕩10 min,使結(jié)晶物充分溶解,在酶標(biāo)儀570 nm處檢測(cè)各孔的吸光值。
客戶提供:
(1)足量樣品、樣品信息(如細(xì)胞類型、分子量、溶解性、穩(wěn)定性、保存條件等);
(2)相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容(如樣品作用時(shí)間、濃度等)、細(xì)胞株等。
細(xì)胞常見的運(yùn)輸方式:
凍存管形式的細(xì)胞:液氮或者干冰條件下運(yùn)輸。
培養(yǎng)瓶形式的細(xì)胞:要求用無(wú)膜培養(yǎng)瓶培養(yǎng),瓶帽旋緊并且用封口膜封口,常溫運(yùn)輸。
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