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C5027-Endonuclease IV 試劑
  • C5027-Endonuclease IV 試劑

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-05-28 09:25:47

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Endonuclease IV 試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

Endonuclease IV 試劑又叫Nfo,來源于E.coli,參與DNA損傷修復(fù)。核酸內(nèi)切酶IV可識別雙鏈DNA分子上的脫嘌呤/脫嘧啶(AP)位點,并切割 AP 位點 5′ 端的第一個磷酸二酯鍵,產(chǎn)生 3′ 羥基和 5′ 脫氧核糖磷酸末端(deoxyribose phosphate, dRP)。另外該酶還具有3′二酯酶活性,能從 DNA 的 3′末端釋放磷酸甘油醛、完整的脫氧核糖 5′-磷酸和磷酸。該酶的最佳底物為AP雙鏈DNA,但對AP單鏈DNA也有一定活性。

單位定義

一單位指在10µl反應(yīng)體系中,37°C反應(yīng)15min,切割1 pmol 含一個AP位點的34mer寡核苷酸雙鏈,所需要的酶量。

酶儲存液

50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 50% Glycerol.

熱失活

85°C 20min。

儲存

置于-20°C可保存2年,避免反復(fù)凍融。


Endonuclease IV 試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

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應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。

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應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)


以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

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雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細(xì)胞,細(xì)胞系,原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產(chǎn)品歡迎咨詢。



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