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LBA4404农杆菌电转感受态细胞

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所  在  地上海市

更新时间:2025-04-09 10:44:40浏览次数:52次

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LBA4404菌株为Ach5型背景,核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif,为了便于转化操作,此菌株携带一无自身转运功能的章鱼碱型Ti质粒pAL4404,此质粒含有vir基因(vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,pAL4404质粒自身的T-DNA转移功能被破坏,但可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移)。

 

 

1、农杆菌相关抗生素配方:

 

抗生素

配方

原液

工作液

羧苄青霉素(carb

双蒸水溶解,0.22um滤膜过滤除菌

50mg/ml

50ug/ml

硫酸卡那霉素(kan

双蒸水溶解,0.22um滤膜过滤除菌

50mg/ml

50ug/ml

链霉素(strep

双蒸水溶解,0.22um滤膜过滤除菌

10mg/ml

50ug/ml

利福平(rif

DMSO溶解,0.22um滤膜过滤除菌

10mg/ml

20ug/ml

庆大霉素(gent

双蒸水溶解,0.22um滤膜过滤除菌

20mg/ml

40ug/ml

 

2、常用农杆菌抗性:(R:抗;S:敏感)

 

农杆菌菌株

羧苄青霉素(carb)

链霉素(strep)

利福平(rif)

庆大霉素(gent)

硫酸卡那霉素(kan)

AGL-1

R

R

R

S

S

EHA105

S

R

R

S

S

LBA4404

S

R

R

S

S

GV3101

S

R

R

R

S

 

3、LBYEB配方:

 

component

LB(液体)/L

LB(固体)/L

component

YEB(液体)/L

YEB(固体)/L

Tryptone

10g

10g

Tryptone

5g

5g

Yeast extract

5g

5g

Yeast extract

1g

1g

NaCl

10g

10g

牛肉浸膏

5g

5g

NaOH

PH7.0

PH7.0

蔗糖

5g

5g

Agar

15g

MgSO4*7H2O

0.49g

0.49g

 

 

 

NaOH

PH7.0

PH7.0

 

 

 

Agar

15g

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