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详细介绍
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
结肠组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7177 |
细胞简介：
小鼠结肠平滑肌分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑?。?，外膜（纤维膜或浆膜）。结肠平滑肌细胞主要分布于黏膜肌层和肌层的内环形、外纵行平滑肌；结肠运动少而缓慢，对刺激的反应也较迟缓。结肠平滑肌在食物消化与吸收、肠道运动和物质分泌、诱发全身炎症反应以及细胞内信号转导途径等研究中起着重要的作用。结肠平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。结肠平滑肌运动活性受到神经递质、胃肠激素和药物等因素的调节。随着现代胃肠动力学研究的进展，对胃肠运动的研究已从器官、组织水平发展到细胞、分子水平，要求在胃肠道单个平滑肌细胞标本上来完成各种电生理、药理和分子生物学等实验。体外培养细胞，由于影响因素单一，是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠结肠平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠结肠平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
?、?消化培养法
?、?悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
抑癌蛋白DKK3 英文名称： Dikkopf 3 规格： 英文缩写： DKK3
脱氢血栓素B2 英文名称： Human 11 dehydro Thromboxane B211 规格： 英文缩写： 11-DH-TXB2
2,3二0酸甘油酸 英文名称： Human 2,3 Diphosphoglycerate 规格： 英文缩写： 2,3-DPG
D二聚体 英文名称： Human D. Dimer 规格： 英文缩写： D.D
鱼补体3(C3)试剂盒
Human aidiuretic hormone / vasopressin / arginine vasopressin (ADH/VP/AVP) ELISA Kit 人抗利尿激素/血管加压素/精加压素(ADH/VP/AVP)试剂盒
HumanVitaminA,VAELISAKit 人A(VA)试剂盒 进口分装
CLIAKitforADH/VP/AVP(Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin)ELISAKit小鼠抗利尿激素/血管加压素/精加压素
血液乙酰酯酶活性荧光法定量试剂盒20次
Mousereducedglathione,GSHELISAKit小鼠还原型(GSH)试剂盒
BHLHE41单克隆抗体
19号染色体开放阅读框71抗体
GLIPR1重组小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白 (His 标签) Protein
基质金属蛋白酶10(MMP10)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)
S100A4重组人 S100A4 蛋白 (His 标签) Protein
CA3 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 (His 标签)
GFRA1 Protein Canine 重组狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (His 标签)
基质金属蛋白酶10(MMP10)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10)
CA3 Protein Human 重组人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 (His 标签)
GLIPR1重组小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白 (His 标签) Protein
GFRA1 Protein Canine 重组狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 (His 标签)
S100A4重组人 S100A4 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠结肠平滑肌细胞大鼠高密度脂蛋白3(HDL3)试剂盒 ，英文名： HDL3 ELISA Kit
Rabbit esadiol (E2) ELISA Kit 兔子雌二醇(E2)试剂盒
C组轮状病毒(HRV-C)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitforMHCELISAKit鱼类主要组织相容性复合体
体液尿酸含量酶偶联比色法定量试剂盒20次
ELISAKitCS牛柠檬酸合成酶
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂??；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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