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详细介绍
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
滑膜 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X8024 |
细胞简介：
小鼠滑膜成纤维分离自滑膜组织；滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构，各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构，同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征，其病理改变累及关节的各个组成部分，但绝不仅局限于软骨，还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响，相互作用，共同加速关节的退变?；は赴枪钩苫げ愕淖畲笙赴禾?，是维持关节正常功能的重要组织结构，它包埋在颗粒状无定性的基质中，基质内有分散的纤维分布?；び?span>A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成?；は赴饕δ埽孩倩は赴蠡撼煞?，并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关；②滑膜细胞增生，表现为不依赖于支持物生长，并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏；③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
方法简介：
实验室分离的小鼠滑膜成纤维采用混合酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
实验室分离的小鼠滑膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率：每2-3天换液一次
生长特性：贴壁
细胞形态：成纤维细胞样
传代特性：可传1-2代左右
消化液：0.25%
培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%
小鼠滑膜成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的优良培养状态。
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
?、?消化培养法
?、?悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
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器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸试剂盒 48T
猪乙型脑病毒(JEV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
猪乙型脑病毒(JEV)核酸试剂盒(-PCR法) 48T
猪血栓素A2(TXA2)试剂盒
Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)试剂盒
Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子肾上腺髓质素(ADM)试剂盒 进口分装
CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形体IgM抗体
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量试剂盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒
8号染色体开放阅读框72抗体
猪蓝耳病病毒GP5蛋白抗体
TIMP1重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B细胞特异性转录因子抗原
ASGR1重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签) Protein
BLNK Protein Human 重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签)
CLEC4F Protein Rat 重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B细胞特异性转录因子抗原
BLNK Protein Human 重组人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 标签)
TIMP1重组小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
CLEC4F Protein Rat 重组大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
ASGR1重组人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠滑膜成纤维细胞大鼠谷酸脱羧酶自身抗体IgM(GAD-Ab-IgM)试剂盒 ，英文名： GAD-Ab-IgM ELISA Kit
Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)试剂盒
粘附性大肠杆菌(EAEC)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M
体液赖(lysine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次
ELISAKitAE禽脑脊髓
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂??；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行
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