化工仪器网
详细介绍
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
皮肤组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 上皮细胞样 | YS-01X7513 |
细胞简介：
小鼠表皮角化分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角化细胞（KC）是构成表皮的主要细胞成分，在体内处于不断增殖过程中，分裂的角化细胞主要位于其基底层，少数位于棘细胞层。随着向表层的推移，细胞的分化程度逐渐增加，并丧失分裂活性。
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂??；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
方法简介：
公司实验室分离的小鼠表皮角化先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的小鼠表皮角化经PCNA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
?、?悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
猪血管紧张素Ⅱ试剂盒 猪血管紧张素Ⅱ试剂盒 规格型号：96T/48T 猪血管紧张素Ⅱ试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血管紧张素Ⅱ试剂盒、猪血管紧张素Ⅱeisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪血管假血友病因子试剂盒 猪血管假血友病因子试剂盒 规格型号：96T/48T 猪血管假血友病因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪血管假血友病因子试剂盒、猪血管假血友病因子eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒 规格型号：96T/48T 猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪心肌肌钙蛋白Ⅰ试剂盒、猪心肌肌钙蛋白Ⅰeisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒 猪纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒 规格型号：96T/48T 猪纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒、猪纤溶酶原激活物抑制因子eisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
猪细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 试剂盒
Human maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 人基质金属蛋白酶4(MMP-4)试剂盒
Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 兔p53(p53)试剂盒 进口分装
CLIAKitforANP(MouseAialNaiureticPeptide)ELISAKit小鼠心肽
血液半胱(cysteine)含量比色法定量试剂盒20次
Porcinegrowthhormone,GHELISAKit猪生长激素(GH)试剂盒
HERC2 E3泛素蛋白连接酶抗体
微丝相关蛋白3抗体
DPP7重组小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein
补体成分3(C3)重组蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
CBLC重组人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
BCL2L2 Protein Human 重组人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 标签)
BTC Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
补体成分3(C3)重组蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
BCL2L2 Protein Human 重组人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 标签)
DPP7重组小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 标签) Protein
BTC Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
CBLC重组人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠表皮角化细胞大鼠环0酸腺苷(cAMP)试剂盒 ，英文名： cAMP ELISA Kit
Rabbit maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/G 兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/G
脑膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸试剂盒 48T
CLIAKitforMousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化细胞内分泌因子/双调蛋白
体液还原型(GSH)浓度比色法定量试剂盒50次
ELISAKitPⅠNP人Ⅰ型原胶原N端前肽
化工仪器网