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毓秀生物科技（上海）有限公司

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[供應(yīng)]載體構(gòu)建,亞克隆,載體克隆

貨物所在地：上海上海市

更新時間：2025-06-04 21:00:06

有效期：2025年6月4日 -- 2025年12月4日

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載體構(gòu)建（vectorconstruction）,為把DNA分子運送到受體細胞中去，必須尋找一種能進入細胞、在裝載了外來的DNA片段后仍能照樣復制的運載體。理想的運載體是質(zhì)粒（plasmid），在基因工程中，常用人工構(gòu)建的質(zhì)粒作為載體。載體構(gòu)建即是構(gòu)建含外源DNA的質(zhì)粒。

　　載體構(gòu)建（vectorconstruction）是分子生物學研究常用的手段之一。依賴于限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和其它修飾酶的作用，分別對目的基因和載體DNA進行適當切割和修飾后，將二者連接在一起，再導入宿主細胞，實現(xiàn)目的基因在宿主細胞內(nèi)的正確表達。載體構(gòu)建主要包括已有載體多克隆位點MCS的改造和已有載體啟動子、增強子、篩選標記等功能元件的改造。載體構(gòu)建完成后可利用PCR原理進行測序驗證。

　　載體構(gòu)建實驗步驟：

　　1）引物設(shè)計，PCR擴增目的片段

　　2）酶切目的片段與載體

　　3）載體構(gòu)建連接或重組

　　4）轉(zhuǎn)化

　　5）涂板

　　6）載體構(gòu)建挑取克隆酶切或PCR鑒定

　　7）測序驗證

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