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當前位置：> 供求商機> IHC免疫組化
貨物所在地：上海上海市
更新時間：2025-06-04 21:00:06
有效期：2025年6月4日 -- 2025年12月4日
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IHC免疫組化操作步驟
⑴、石蠟切片脫蠟至水。
⑵、 3%H 2 O2 室溫孵育 5-10 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。
⑶、蒸餾水沖洗， PBS 浸泡 5 分鐘 x2 （如需抗原修復，可在此步后進行）。
⑷、 5-10% 正常山羊血清（PBS 稀釋）封閉，室溫孵育 10 分鐘，傾去血清，勿洗。滴加一抗 工作液， 37 ℃ 孵育 1-2 小時或 4 ℃ 過夜。
⑸、 PBS 沖洗， 5 分鐘 x3 次。
⑹、滴加適量 生物素標記二抗 工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。
⑺、 PBS 沖洗， 5 分鐘 x3 次。
⑻、滴加適量的 辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素 工作液， 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。
⑼、 PBS 沖洗， 5 分鐘 x3 次。
⑽、顯色劑顯色 3-15 分鐘（DAB 或 NBT/BCIP）
⑾、自來水充分沖洗，蘇木素復染，脫水，透明，封片。
IHC免疫組化是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及相對定量的研究，稱為免疫組織化學技術（immunohistochemistry）
IHC免疫組化原理
免疫組織化學利用了抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性。先將組織或細胞中的某種化學物質(zhì)提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來，以其達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。
IHC免疫組化結果判定：
陽性組織為棕色（DAB顯色）或是紫紅色（NBT/BCIP）著色
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