详细介绍
商品介绍:
工作原理: 在机体内部随时都在发生着细胞的死亡。传统上用显微镜来观察细胞的死亡,其特征为核染色质的浓缩及碎片的形成。但是这种现象出现的很晚,时间也很短暂。凋亡的特征是内源性核酸内切酶被激活,细胞自身的染色质或DNA 被切割,出现单链或双链缺口,并产生与 DNA 断点数目相同的3’-OH 末端。末端脱氧核糖核酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以将标记的dUTP(DIG-dUTP)标记至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 结合在 DNA 断点部位,可以通过生物标记的抗抗体(Anti-DIG-Biotin)反应后,再结合链酶亲和素-荧光素 FITC(SABC-FITC)。FITC 在 490-495nm 激化,在 520-530nm 发射荧光,呈黄绿色。凋亡的细包核呈黄绿色,从而可以在显微镜下观察到着色的凋亡细胞。 |
保存条件:-20℃冰冻保存一年。
试剂盒内容:
1.标记缓冲液(Labeling Buffer)1ml
2.末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT,×20)20μl
3.DIG-dUTP(×20)20μl
4.封闭液(Blocking Reagent)4ml
5.生物素化抗抗体(× 100)20μl
6.SABC-FITC(× 100)20μl
7.Proteinase K(×200)50μl
8.抗体稀释液 4ml
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
20T | 1~3天 |
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)elisa试剂盒英文名称:FGFR1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白157抗体包装5g
成纤维细胞生长因子7(FGF7)elisa试剂盒英文名称:FGF7 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白90B抗体包装10MG
成纤维细胞生长因子3(FGF3)elisa试剂盒英文名称:FGF3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体包装25g
成纤维细胞生长因子23(FGF23)elisa试剂盒英文名称:FGF23 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白104抗体包装5g
成纤维细胞生长因子18(FGF18)elisa试剂盒英文名称:FGF18 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白12抗体包装1g
成纤维细胞生长因子15(FGF15)elisa试剂盒英文名称:FGF15 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白67抗体包装25g
成纤维细胞生长因子13(FGF13)elisa试剂盒英文名称:FGF13 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白129抗体包装5g
成纤维细胞生长因子12(FGF12)elisa试剂盒英文名称:FGF12 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白107抗体包装1g
成纤维细胞生长因子11(FGF11)elisa试剂盒英文名称:FGF11 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白18抗体包装5g
成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)elisa试剂盒英文名称:FAPα ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白56抗体包装1g
沉默调节蛋白6(SIRT6)elisa试剂盒英文名称:SIRT6 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白116抗体包装5g
沉默调节蛋白1(SIRT1)elisa试剂盒英文名称:SIRT1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白117抗体包装1g
超氧化物歧化1(SOD1)elisa试剂盒英文名称:SOD1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白127抗体包装100g
肠型脂肪结合蛋白(FABP2)elisa试剂盒英文名称:FABP2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白138抗体包装25g
叉头框蛋白P3(FOXP3)elisa试剂盒英文名称:FOXP3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白144NL抗体包装5g
立枯丝核菌Thanatephorus│cucumeris (A.B. Frank) Donk 质量规格:>99%,BR游离状腺试剂盒2-O-乙酰山椒子烯酮;
庞蒂亚克亚硫盐杆菌Sulfitobacter│pontiacus 质量规格:HPLC>98%,标准品游离睾酮试剂盒柚皮-7-O-葡萄糖苷;Narin
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:>98%,BR游离蛋白S试剂盒异飞蓟宾;Isosilybin
细胞凋亡检测试剂盒III(FITC)乙二胺四乙二钠钙盐
其他 乙二胺四乙钙二钠;EDTA二钠钙;依地钙二钠二水合物;依地钠钙;EDTA 钙钠盐
英文名称: EDTA-2NaCa
其他英文名称: Ethylenediaminetetraacetic acid disodium calcium salt hydrate;Calcium disodium ethylenediaminetetraacetate hydrate
产品规格: 特纯,97%
包装:250克
CAS号:23411-34-9
C10H12N2O8CaNa2•xH2O=374.27 (anhydrous basis)
级别:purum
含量:≥97.0%
水溶解试验:合格
水分:≤10.0%
性状:结晶或结晶性粉末。溶于水和,几乎不溶于有机溶剂。30℃时 0.1mol/L水溶液pH约7。铅和其他重金属离子交换钙形成水溶性重金属络合物。有刺激性。商品也有含2分子结晶水的
用途:生化研究。络合剂。食品、油脂、饮料的色泽稳定剂。调味剂
保存:RT