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详细介绍
产品属于：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit | 100T | 1～3天 |
商品介绍：
本试剂盒各组分均以无菌形式提供，可直接用于细胞实验。台盼蓝（Trypan Blue），一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料，可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜，将其染成蓝色，而活细胞由于其细胞膜的完整性，可将台盼蓝排斥在外，因此，通过颜色的变化即可将活细胞（活细胞呈透明无色）和死细胞鉴别开来，基于此原理，本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外，台盼蓝（合适浓度）还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。 |
使用方法
1）对于悬浮细胞，离心收集细胞，对其充分清洗后，加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液；对于贴壁细胞，先用胰酶消化细胞，再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2）取0.1ml单细胞悬液，按照1:1比例与0.1ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀，室温染色3~10min。
【注】：因台盼蓝具有细胞毒性，染色时间过久会导致部分死细胞染色，干扰计数。通常染色3min即可。
3）取少量上述染色细胞加入血细胞计数，于显微镜低倍镜下计数，分别计算着色细胞（即损伤细胞和死细胞）和总细胞。
【注1】：用移液枪加染色细胞时，沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其*覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】：1mm2方格内细胞数通?？刂圃?0-50 cells，当细胞数超过200个，需重新调整稀释倍数。
4）按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比，
a，计算每ml细胞数目：Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104；【注】：此时的稀释倍数为：步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b，总细胞数目：Total cells=（Cells/ml）×最初制备单细胞悬液的总体积
c，细胞活力值：Viability（%）=（总细胞数-总着色细胞数）/总细胞数×100
【注】：通常情况，健康的对数期培养细胞，活细胞至少占到95%。
储存条件：室温，有效期2年
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
单核细胞趋化蛋白2(MCP2)elisa试剂盒英文名称：MCP2 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体包装25g
单核细胞趋化蛋白1(MCP1)elisa试剂盒英文名称：MCP1 ELISA Kit周期B3抗体包装1g
单氧化A(MAOA)elisa试剂盒英文名称：MAOA ELISA Kit羧肽X(M14家族2)抗体包装25g
存活(Surv)elisa试剂盒英文名称：Surv ELISA Kit上皮钙粘附分子结合蛋白E7包装5g
簇集蛋白(CLU)elisa试剂盒英文名称：CLU ELISA Kit周期D结合蛋白1抗体包装1g
促胰液(SCT)elisa试剂盒英文名称：SCT ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白120抗体包装5g
促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa试剂盒英文名称：TPPP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白23抗体包装1g
促泌(SCGN)elisa试剂盒英文名称：SCGN ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白89抗体包装25g
刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)elisa试剂盒英文名称：HHIP ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白30抗体包装5g
次磷核糖基转移1(HPRT1)elisa试剂盒英文名称：HPRT1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白40抗体包装5mg
雌激受体β(ERβ)elisa试剂盒英文名称：ERβ ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白114抗体包装100g
雌激受体α(ERα)elisa试剂盒英文名称：ERα ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白39抗体包装25g
垂体腺苷环化激活肽(ADCYAP1)elisa试剂盒英文名称：ADCYAP1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白34抗体包装25g
穿孔1(PRF1)elisa试剂盒英文名称：PRF1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白75抗体包装5g
成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)elisa试剂盒英文名称：FGFR3 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白65抗体包装25g
光硬皮马勃Scleroderma│cepa Pers. 质量规格：含量>98.5%，类白色粉末游离三状腺原试剂盒盐白屈菜红碱;Chelerythrin
嗜盐潮间带杆菌Aestuariibacter│halophilus 质量规格：>99%,USP31游离肉碱elisa试剂盒银杏酚;Ginkgolic acids
猪链球菌Streptococcus│suis 质量规格：HPLC>98%,标准品游离前列腺特异性抗原试剂盒野菊花内酯;Yejunualactone
台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒乙二胺四乙二钠镁盐
其他 EDTA二钠镁；乙二胺四乙镁二钠盐； (OC-6-21)-[[N,N’-1,2-乙二基双[N-(羧基甲基)甘合]](4-)-N,N’,O,O’,O,N,O,N’-镁(2-)二钠盐；EDTA镁钠盐
英文名称： EDTA-MgNa2
其他英文名称： Ethylenediaminetetraacetic acid disodium magnesium salt；EDTA magnesium disodium；Magnesium sodium ethylenediaminetetraacetate
产品规格： CP，98.5%
包装：100克
CAS号：14402-88-1
C10H12N2Na2MgO8=358.50
级别：CP
含量：98.5～101.0%
澄清度试验：合格
铁：≤0.002%
重金属：≤0.001%
性状：结晶性粉末。易潮解。溶于水和
用途：生化研究。络合剂，测定钢铁中镍、络、锰离子(用于取代滴定)。
保存：RT
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
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