详细介绍
英文名称:SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit
产品规格:500T
发货周期:1~3天
本试剂盒是一种常用的比色法检测细胞增殖和毒性的试剂盒,其检测原理:磺酰罗丹明(Sulforhodamine B,SRB)是一种水溶性蛋白染料,能与细胞内蛋白碱性氨基酸结合形成复合物,其结合于细胞中总蛋白量的多少可以反映细胞数的多少。在515nm波长处测得的吸光值与细胞数呈良好的线性关系。 本试剂盒检测速度快、线性好、操作简单方便,以96孔板为例,可检测500次。 |
使用方法(以96孔板为例)
1)取出细胞,弃去培养液;
2)小心加入固定液,每孔100μl,4℃孵育1h,弃去固定液;
3)加入清洗液1,每孔100μl,室温下静置30s,弃去清洗液1,重复该步骤;
4)加入染色液,每孔50μl,室温下避光孵育15min,弃去染色液;
5)加入清洗液2,每孔100μl,弃去清洗液2(该步骤需快速完成,以免染色漏出胞外),重复该步骤5-10次,直至把多染料洗尽为止;
6)加入溶解液,每孔100μl,室温下避光孵育5min;
7)于515nm波长检测其吸光值。
储存条件:4℃,有效期1年
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
蛋白激活受体3(PAR3)elisa试剂盒英文名称:PAR3 ELISA Kitα1-chimaerin蛋白抗体包装25g
蛋白激活受体2(PAR2)elisa试剂盒英文名称:PAR2 ELISA Kit信号转导蛋白9复合体7b抗体包装5g
蛋白3(PR3)elisa试剂盒英文名称:PR3 ELISA Kit钙调神经磷调节蛋白1抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白1)包装1g
蛋白磷3调节因子亚基1(PPP3R1)elisa试剂盒英文名称:PPP3R1 ELISA Kit钙调神经磷调节蛋白3抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白3)包装5g
蛋白酪磷受体O(PTPRO)elisa试剂盒英文名称:PTPRO ELISA KitCentaurin α1抗体包装1g
蛋白酪磷受体H(PTPRH)elisa试剂盒英文名称:PTPRH ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11/锌指蛋白856抗体包装5g
蛋白激抑制因子γ(PKIγ)elisa试剂盒英文名称:PKIγ ELISA KitB淋巴白血病/淋巴瘤11B抗体包装25g
蛋白激抑制因子β(PKIβ)elisa试剂盒英文名称:PKIβ ELISA Kit钙平衡调节蛋白1抗体包装5g
蛋白激N2(PKN2)elisa试剂盒英文名称:PKN2 ELISA Kit阿尔茨海默病淀粉样蛋白相关胶原蛋白抗体包装100mg
蛋白激D1(PRKD1)elisa试剂盒英文名称:PRKD1 ELISA Kit老年痴呆相关类钙粘蛋白CS1抗体包装1g
蛋白激Cη(PKCη)elisa试剂盒英文名称:PKCη ELISA Kit凋亡诱导蛋白NALP3抗体包装25g
蛋白激Cζ(PKCζ)elisa试剂盒英文名称:PKCζ ELISA Kit猪圆环?、蛐鸵驴堑鞍卓固灏?g
蛋白激Cε(PKCε)elisa试剂盒英文名称:PKCε ELISA Kit血管加压激活钙启动受体蛋白1抗体包装25g
蛋白激Cδ(PKCδ)elisa试剂盒英文名称:PKCδ ELISA Kit干生长因子受体/表面分化抗原抗体包装5g
蛋白激Cα相互作用蛋白1(PICK1)elisa试剂盒英文名称:PICK1 ELISA Kit离子通道蛋白6抗体包装1g
根瘤菌Rhizobium│sp. 质量规格:purity>99.0%,BR鱼精蛋白1试剂盒叶黄;Xanthophyll
粗壮假丝酵母Candida│valida 质量规格:HPLC>99%,标准品诱导型一氧化氮合成试剂盒愈创木酚;Guaiacol
: Charwoman资源名称: 链球菌 质量规格:含量>99.0%有丝分裂原活化蛋白激14试剂盒异丁香酚;Isoeugenol
磺酰罗丹明B(SRB)细胞增殖和毒性检测试剂盒乙二胺四乙二钠锰盐
其他 乙二胺四乙锰二钠;EDTA二钠锰;EDTA锰二钠;EDTA锰钠盐
英文名称: Manganese disodium EDTA trihydrate
其他英文名称: Ethylenediaminetetraacetic acid manganese disodium salt hydrate;EDTA manganese(II) disodium salt trihydrate
产品规格: AR,97%
包装:100克
CAS号:15375-84-5
C10H12N2O8MnNa2•xH2O=389.13(anhydrous basis)
级别:AR
含量:≥97.0%
水分:≤10.0%
性状:粉末
用途:生化研究。络合剂。食品、油脂、饮料的色泽稳定剂。调味剂
保存:RT
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)