详细介绍
中文名称:阿尔玛蓝
英文名称:Alamar Blue
产品规格:100T
发货周期:1~3天
阿尔玛蓝(Alamar Blue)是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸亮度变化和荧光信号。这是一种安全无毒的染料,可用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究,能有效测定动物、真菌和细菌细胞的天然代谢活性。Alamar Blue在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗,因而常被用作氧化还原指示剂,以显示被观察细胞和细菌的代谢活动。这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性,因此对应的信号较低??梢杂闷胀ǚ止夤舛燃苹蛴夤舛燃萍觳猓浼し⒐獠ǔぴ?30-560 nm之间,发射光波长为590 nm。吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。 |
本品可广泛地用于细胞增殖代谢,药物的细胞毒作用的体外测定以及病原微生物的的快速检测与鉴定。 与台盼兰、TTC、MTT、MTS等分析法相比,Alamar Blue具有更多的优势。Alamar Blue采用单一试剂,可以连续、快速地检测细胞的增生状态。由于Alamar Blue对细胞无毒、无害,不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,因此可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察和进一步的实验观察,因此有操作简便和几乎不干扰细胞正常代谢的特点。
注意事项
1)需客户自行准备100%还原型Alamar Blue试剂。为得到还原型Alamar Blue,需配制Alamar Blue与细胞培养基的混合溶液,Alamar Blue与细胞培养基的比值为1:10,高压灭菌15min。(不能对浓缩的Alamar Blue高压灭菌,也不能用PBS配制溶液,因为100%还原型Alamar Blue在PBS中不稳定。)
2)为得到结果,建议实验前先摸索孵育时间和接种细胞数量。
3)合适密度的细胞可以增加检测灵敏度。对于96 孔板,我们建议每孔接种100 微升细胞,细胞浓度范围为:贴壁细胞在100-10,000/孔,悬浮细胞在2,000-50,000/孔,并以培养基为空白对照。对于384 孔板,细胞浓度和接种量均减半。
4)整个过程均应为无菌操作,因为微生物污染物同样可以还原检测试剂而影响实验结果。
5)注意接种细胞浓度和加入检测试剂后孵育时间。细胞浓度过高或孵育时间过长,会导致继发性还原反应,产生无色和荧光消失。
6)孵育时,须避光。
7)本产品可以使用荧光或分光光度计检测,但荧光的灵敏度高,实验误差小,推荐使用荧光检测。
储存条件:4℃,有效期一年
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)elisa试剂盒英文名称:PLUNC ELISA Kit19号染色体开放阅读框80抗体包装100g
多效生长因子(PTN)elisa试剂盒英文名称:PTN ELISA Kit半胱双加氧1抗体包装25g
多配体蛋白聚糖1(SDC1)elisa试剂盒英文名称:SDC1 ELISA Kit胶原蛋白11A2抗体包装5g
多聚免疫球蛋白受体(PIGR)elisa试剂盒英文名称:PIGR ELISA KitCUL4B蛋白抗体包装1g
多聚蛋白2(MMRN2)elisa试剂盒英文名称:MMRN2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框103抗体包装5g
多功能肽2(LMP2)elisa试剂盒英文名称:LMP2 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗体包装25g
多功能蛋白聚糖(VS)elisa试剂盒英文名称:VS ELISA Kit促肾上腺皮质激释放激结合蛋白抗体包装5g
多巴胺转运蛋白(DAT)elisa试剂盒英文名称:DAT ELISA Kit3号染色体开放阅读框23抗体包装1g
多巴胺受体D4(DRD4)elisa试剂盒英文名称:DRD4 ELISA Kit瓜环肽抗体包装25g
多巴胺受体D3(DRD3)elisa试剂盒英文名称:DRD3 ELISA Kit分裂核仁蛋白1抗体包装5g
多巴胺受体D1(DRD1)elisa试剂盒英文名称:DRD1 ELISA Kit钙/钙调蛋白依赖性蛋白激4抗体包装1g
多胺氧化(PAOX)elisa试剂盒英文名称:PAOX ELISA Kit磷化钙/钙调蛋白依赖性蛋白激4抗体包装25g
对氧磷2(PON2)elisa试剂盒英文名称:PON2 ELISA Kit胶原蛋白4a2亚基抗体包装5g
对氧磷1(PON1)elisa试剂盒英文名称:PON1 ELISA KitCD161c抗体包装100g
端粒关联蛋白1(TEP1)elisa试剂盒英文名称:TEP1 ELISA Kit补体C1r链多肽抗体包装25g
根瘤菌(紫云英)Mesorhizobium│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品孕激/孕酮试剂盒野马追内酯A;Eupalinolide
: ivcas7.01221资源名称: 蕈状芽胞杆菌 质量规格:>97%,进分sigma货号A3656 钥孔虫戚血蓝蛋白试剂盒乙氧基白屈菜红碱; 5-Ethoxych
: 65092442资源名称: 羊布氏菌 质量规格:>99%,BR钥孔虫戚血蓝蛋白试剂盒异夏佛塔苷;Isoschaftoside
阿尔玛蓝乙二胺四乙二钠锌盐
其他 乙二胺四乙锌二钠;EDTA二钠锌
英文名称: Disodium zinc ethylenediaminetetraacetate tetrahydrate
产品规格: AR,98%
包装:100克
CAS号:176736-49-5
C10H12N2O8ZnNa2•4H2O=471.64
级别:AR
含量:≥98.0%
干燥失重:14~16%
free zinc:≤0.01%
heavy metals:<0.001%
性状:粉末
用途:生化研究。络合剂。食品、油脂、饮料的色泽稳定剂。调味剂
保存:RT
操作规程:
1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)