详细介绍
商品介绍:
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE对细胞进行示踪及增殖检测的试剂盒,由CFDA,SE粉末、溶剂及相关细胞染色缓冲液组成,该试剂盒主要工作原理为:CFDA, SE具有细胞膜渗透性,本身不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后,可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE),后者可发强烈的绿色荧光,不能穿透细胞膜,能完好的保留在胞内。CFSE还可自发性并不可逆地与细胞内的氨基结合从而偶联到细胞蛋白质上,同时过量且未被偶联的CFDA, SE通过被动扩散回到细胞外培养基内,被后续清洗步骤所清除。经CFDA, SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数月,因此非常适用于细胞群落分析。 |
CFDA, SE标记细胞的荧光非常均一,优于以前使用的其他细胞示踪荧光探针如PKH26,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪(FL1通道)根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。CFSA,SE可检测分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA, SE标记的细胞可用于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴细胞的增殖检测,也可用于成纤维细胞,自然杀伤细胞,造血祖细胞等其他细胞的增殖检测。
CFDA, SE标记细胞呈绿色荧光,Ex=494nm,Em=521nm,除了流式细胞仪检测细胞增殖外,还可用荧光酶标板定量活细胞数目,或者用荧光显微镜进行均一染色的细胞示踪观察。
本品为CFDA,SE细胞增殖与示踪检测试剂盒,包含配制CFDA,SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液,简化了实验前期准备工作。另,CFDA,SE标记细胞一般15min即可完成,对于不同细胞,需要自行摸索最佳标记时间。按照每个样本的标记体积为2ml计算。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1~3天 |
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大?。?/span>
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
解整合金属蛋白9(ADAM9)elisa试剂盒英文名称:ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白62抗体包装250mg
解整合金属蛋白8(ADAM8)elisa试剂盒英文名称:ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白64抗体包装25g
结合珠蛋白(Hpt)elisa试剂盒英文名称:Hpt ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白72抗体包装5g
接触蛋白1(CNTN1)elisa试剂盒英文名称:CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白73抗体包装100g
窖蛋白(CAV1)elisa试剂盒英文名称:CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白74B抗体包装25g
角质转谷酰胺(TGM1)elisa试剂盒英文名称:TGM1 ELISA Kit19号染色体开放阅读框25抗体包装5g
角蛋白9(KRT9)elisa试剂盒英文名称:KRT9 ELISA Kit19号染色体开放阅读框42抗体包装100g
角蛋白18(KRT18)elisa试剂盒英文名称:KRT18 ELISA Kit19号染色体开放阅读框44抗体包装25g
胶质细胞系来源神经营养因子(GDNF)elisa试剂盒英文名称:GDNF ELISA Kit19号染色体开放阅读框48抗体包装500g
腱蛋白样蛋白2(CHRDL2)elisa试剂盒英文名称:CHRDL2 ELISA Kit19号染色体开放阅读框50抗体包装100g
碱性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)elisa试剂盒英文名称:Alk-Smase ELISA Kit19号染色体开放阅读框51抗体包装25g
碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)elisa试剂盒英文名称:FGF2 ELISA Kit19号染色体开放阅读框52抗体包装5g
剪接因子3B亚基3(SF3B3)elisa试剂盒英文名称:SF3B3 ELISA Kit19号染色体开放阅读框55抗体包装1g
间隙连接蛋白43(CX43)elisa试剂盒英文名称:CX43 ELISA Kit19号染色体开放阅读框56抗体包装5g
间皮(MSLN)elisa试剂盒英文名称:MSLN ELISA Kit19号染色体开放阅读框57抗体包装25g
: T63资源名称: 伤寒沙门氏菌 质量规格:HPLC>98%,标准品脂肪结合蛋白4试剂盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:> 99%,EP脂肪甘油三酯脂试剂盒异肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格:HPLC>98%,标准品脂肪分化相关蛋白试剂盒异七叶皂苷Ib;Isoescin Ib
细胞增殖与示踪检测试剂盒乙铵
其他 乙铔;醋铵;乙铵盐;醋
英文名称: Ammonium acetate
其他英文名称: Acetic acid ammonium salt
产品规格: AR,98%
包装:500克
CAS号:631-61-8
C2H7NO2=77.08
级别:AR
含量:≥98.0%
pH(50g/L,25℃):6.5~7.5
澄清度试验:合格
钙:≤0.001%
还原高锰钾物质:≤0.01%
硫盐:≤0.002%
磷盐:≤0.0005%
氯化物:≤0.0005%
镁:≤0.0004%
水不溶物:≤0.005%
铁:≤0.0005%
重金属:≤0.0005%
硝盐:≤0.001%
灼烧残渣:≤0.005%
性状:无色结晶。稍有乙气味。极易潮解。易溶于水和乙,微溶于酮。水溶液呈弱性,0.5mol/L水溶液的pH为7.0。相对密度(d204)1.17。熔点114℃。致死量(小鼠,静脉)1.8mG(NH+4)/20G。有刺激性。
用途:生化研究。用以配制缓冲液,测定铝和铁。从其他硫盐分离硫铅
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