详细介绍
参数规格:
产品货号:FS-P013547
产品规格:50次
产品分类:纯化试剂盒
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
Beta-lactoglobulin/FITC 荧光标记β-乳球蛋白抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Socs 1/FITC 荧光标记细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AKR1D1 固酮还原家族1成员D1抗体 0.2ml
Rabbit horse IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗马IgG 0.3ml
GABARAPL2 G1基丁A型受体相似蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG whole serum 兔抗豚鼠IgG抗血清 1ml
Socs 1/FITC 荧光标记细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
1,3-DPG(Human 1,3-Disphosphoglycerate, ELISA Kit 人1,3-二磷甘油Multi-class antibodies: 48T
MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗体(N-端)Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh ITPR1 5-三磷肌醇受体1抗体 0.2ml
ECF ELISA Kit 大鼠嗜粒细胞趋化因子 96T
Proteasome 19S S5A 26S蛋白调节亚型S5a抗体 0.2ml
C22orf13 22号染色体开放阅读框13抗体 0.2ml
MK1/MAPKK1/MKK1 MK1/MAPKK1抗体(N-端)Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey rabbit IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的驴抗兔IgG 0.1ml
GCC2 高尔基体卷曲螺旋蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ART4/CD297 二磷腺苷核糖基转移4抗体 0.2ml
Icos/CD278/FITC 荧光标记诱导协同刺激分子CD278抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgG 0.1ml
p-PKC/FITC 荧光标记磷化蛋白激C抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腮腺炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒50次变形杆菌种属: Proteus│sp.提供形式: 冻干物安全等级: 3模式菌株: no应用领域: Kauffmann血清型 21a 1abc培养基: CM0051生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法
金色链霉菌种属: Streptomyces│aureus提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 12生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法
纤维链霉菌种属: Streptomyces│cellulosae提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
苏云金芽胞杆菌种属: Bacillus│thuringiensis分离基物: 1-5cm土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 科研研究培养基: 0002生长条件: 30℃存储条件: -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法
八聚体转录因子(OTF2A)ELISA试剂盒乙酮 CP,98%硬脂镉 AR咔唑(>95%,BR)
艾杜糖硫酯(IDS)ELISA试剂盒乙酮 GR,≥99.0% (GC)硫化亚铁 Fe,60.0 - 72.0 %香柏油
癌症促凝(CP)ELISA试剂盒异佛尔酮二 99%硬酯铅 AR硝铈六
癌胚铁蛋白(CEF)ELISA试剂盒乙酰乙基烯乙酯 95% Standard for GC硫铈八(>97%,BR)
癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒烯酰 AR,99.0%化镍 CP,98.0% 三氧化二铬(>99%,BR)
癌抗原27-29(CA 27-29)ELISA试剂盒己二二酰肼 98%化镍 anhydrous, 99.99% metals basis四氧化三钴(>99%,BR)
癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒正丁 AR,98.5%肼 AR,98.0%乙钴四(>99.5%,BR)
阿米巴(Amebiasis)ELISA试剂盒1,4-丁二 99%苦酮 AR钴粉(>99%,BR)
阿立新A(Orexin A)ELISA试剂盒二乙二丁 99% CP,99.0%(剧品)铜粉(>99.5%,BR)
阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒二乙二丁 CP GR,99.8%式碳铜(铜纯度:52.5~56.5%)
阿黑皮原(POMC)ELISA试剂盒1,3-丁二 99% 99.995%氧化铜粉(>99%,BR)
吖啶橙(AO)ELISA试剂盒1,3-丁二 分析标准品玫瑰红 Indicator焦铜
ω干扰(IFN-ω/IFNB)ELISA试剂盒1,3-丁二 98%过氧化钠 95%铜三(>98%,BR)
κB抑制蛋白激(IKK)ELISA试剂盒基硅 Wacker quality, ≥99.0% (GC)高钠 ACS, 99.8-100.3% 2'-脱氧腺苷5'二三钠盐(>97%,BR)
γ肽(Pγ)ELISA试剂盒二酮 ≥99.0%(GC)亚硝钴钠 AR,Co 13.5~14.5%2'-脱氧胞苷-5'-二三钠盐(分子生物学级)
γ谷氨酰转移(GGT)ELISA试剂盒正十二硫 98%偏铝钠 AR(>98%,BR)