详细介绍
参数规格:
产品名称:无乳链球菌PCR检测试剂盒
产品货号:FS-02R6486
产品规格:48T
产品分类:水产养殖病害检测系列(恒温荧光法)
产品运输:低温运输
实验过程:
一、试剂准备 1. DNA模板 2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步骤 1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。 2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4℃条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
PP ELISA Kit 大鼠胃蛋白Multi-class antibodies: 48T
Transferrin 转铁蛋白抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GIMAP8 GTPIMAP家族成员8抗体 0.2ml
Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 96T
Nuclear Pore Complex Proteins 核孔复合体蛋白抗体 0.2ml
Alpha-Synuclein 核突触蛋白抗体 0.1ml
Transferrin 转铁蛋白抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3αMulti-class antibodies: 48T
GPA33 糖蛋白A33抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Bov IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗IgG 0.1ml
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦受体 96T
RLBP1L1 视黄结合蛋白1抗体 0.2ml
C8orf70 8号染色体开放阅读框70抗体 0.2ml
GPA33 糖蛋白A33抗体Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit chicken IgM/PE PE标记的兔抗鸡IgM 0.1ml
GCET1 B细胞中心相关蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTSL4 整合样金属蛋白与样4蛋白抗体 0.2ml
M2-PK /FITC 荧光标记丙酮激-M2(小鼠来源抗体)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/APC APC标记的兔抗鸡IgG 0.1ml
TCRG/FITC 荧光标记抗T细胞受体γ抗体IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
无乳链球菌PCR检测试剂盒通用型牛副结核?。?/span>Johne’s disease或M. paratuberculosis)20次大鼠热休克蛋白20elisa检测试剂盒
基因检测试剂盒大鼠通道蛋白4elisa检测试剂盒
通用型牛呼吸综合症(BRSV)基因检测试剂盒20次大鼠甲状腺球蛋白elisa检测试剂盒
通用型牛钩端螺旋体(L. hardjo)基因检测试剂盒20次大鼠绒毛膜促性腺βelisa检测试剂盒
通用型牛白血病(Bovine Leukemia Virus/Enzootic Bovine Leukosis;BLV/EBL)基因检测试剂盒20次大鼠热休克蛋白60elisa检测试剂盒
通用型牛蓝舌?。?/span>Blue Tongue)基因检测试剂盒20次大鼠血清淀粉样蛋白Aelisa检测试剂盒
通用型牛(BCV)基因检测试剂盒20次大鼠内elisa检测试剂盒
通用型牛轮状病毒(ROTO)基因检测试剂盒20次大鼠新生甲状腺elisa检测试剂盒
通用型??谔阋撸?/span>FMDV)基因检测试剂盒20次小鼠乙型肝炎e抗原elisa检测试剂盒
通用型牛副流感(PIV)基因检测试剂盒20次小鼠骨成型蛋白2elisa检测试剂盒
通用型牛隐性炎基因检测试剂盒20次小鼠白介11elisa检测试剂盒
通用型牛布氏杆菌(Brucella abortus)基因检测试剂盒20次小鼠白介8elisa检测试剂盒
通用型牛猪绵羊附睾种布鲁氏菌(Brucella ovis)20次小鼠血栓调节蛋白elisa检测试剂盒
基因检测试剂盒小鼠Ⅱ型胶原elisa检测试剂盒
通用型牛沙眼衣原体(Chlamydia)基因检测试剂盒20次大鼠脂蛋白脂elisa检测试剂盒
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。