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详细介绍
参数规格：
产品名称：锦鲤疱疹病毒（KHV）PCR检测试剂盒
产品货号：FS-02R6462
产品规格：48T
产品分类：水产养殖病害检测系列（恒温荧光法）
产品运输：低温运输
实验过程：
一、试剂准备 1. DNA模板 2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步骤 1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。 2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。 |
注意事项
1.公司产品仅用于科研整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在第一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
MYL1/MYL2 /FITC 荧光标记肌球蛋白轻链1/2抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRIM32/FITC 荧光标记TRIM32抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCD1/CCL22 嗜粒细胞趋化蛋白22抗体 0.1ml
Mouse Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GDF8 生长分化因子8抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rab25 癌基因RAS相关蛋白Rab25抗体 0.2ml
TRIM32/FITC 荧光标记TRIM32抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Human Secretin ELISA Kit 人促胰液/胰泌Multi-class antibodies： 48T
TRT/TERT 端粒抗体Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MARCH11 膜相关环指蛋白11抗体 0.2ml
SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT 人血清/糖皮质调节激2 96T
RNF122 环指蛋白122抗体 0.2ml
Phospho-Beta Catenin (Thr41 + Ser45) 磷化β 连环蛋白抗体 0.1ml
TRT/TERT 端?？固錗ulti-class antibodies： 0.1ml
Rabbit chicken IgG/APC APC标记的兔抗鸡IgG 0.1ml
GAS8 生长停滞特异性蛋白8抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAM20 去整合样金属蛋白20抗体 0.2ml
Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 荧光标记磷化丙蛋白激C底物Marcks抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗IgM 0.1ml
TFR/CD71/FITC 荧光标记转铁蛋白受体抗体IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
锦鲤疱疹病毒（KHV）PCR检测试剂盒通用型亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠血管紧张Ⅱelisa检测试剂盒
细胞亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠抑瘤Melisa检测试剂盒
组织亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠膀胱肿瘤抗原elisa检测试剂盒
血液亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠Ⅰ型胶原N末端肽elisa检测试剂盒
体液亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠胶原Ielisa检测试剂盒
植物亮（leucine）含量比色法检测试剂盒20次大鼠孤腓肽elisa检测试剂盒
通用型亮（leucine）含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠性磷elisa检测试剂盒
细胞亮（leucine）含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠转化生长因子β2elisa检测试剂盒
组织亮（leucine）含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠S100B蛋白elisa检测试剂盒
血液亮（leucine含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠幽门螺旋菌IgGelisa检测试剂盒
体液亮（leucine）含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠戊糖elisa检测试剂盒
植物亮（leucine）含量高效液相色谱法检测试剂盒20次大鼠肝脂elisa检测试剂盒
通用型赖（lysine）含量化学比色法检测试剂盒20次大鼠γ干扰elisa检测试剂盒
细胞赖（lysine）含量化学比色法检测试剂盒20次大鼠Ⅰ型胶原elisa检测试剂盒
组织赖（lysine）含量化学比色法检测试剂盒20次大鼠β-防御elisa检测试剂盒
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