詳細介紹
小鼠真皮毛乳頭原代細胞
小鼠真皮毛乳頭細胞分離自皮膚毛囊組織;毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭,中心是一根毛發(fā),立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上,附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸,毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中,毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度,它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘,以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成,除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭(毛乳頭)外,毛囊其余部分都是由表皮細胞分化而來。真皮毛乳頭細胞位于毛囊基底部,是一類成纖維細胞。在毛囊發(fā)育早期,真皮細胞向單層上皮細胞發(fā)出第一真皮信號,刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細胞向下方的真皮發(fā)出第一表皮信號,誘導(dǎo)其形成有成纖維細胞組成的凝集細胞團。在此過程中,毛母質(zhì)細胞逐漸包裹凝集細胞團,形成成熟的真皮毛乳頭細胞。作為毛囊中的重要細胞群,真皮毛乳頭細胞的分子機制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認識和解析。
英文名稱 | Mouse Dermal Hair Papilla Cells | 組織來源 | 皮膚組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7724 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠真皮毛乳頭細胞
組織來源:皮膚組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠真皮毛乳頭采用膠原酶-蛋白酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠真皮毛乳頭經(jīng)層粘連蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8 透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL | 核糖核酸結(jié)合蛋白1抗體 |
T細胞急性淋巴細胞性白血病1蛋白/淋巴瘤蛋白5抗體 | 細胞外基質(zhì)蛋白2抗體 |
錨蛋白重復(fù)域53抗體 | 電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體 |
源性營養(yǎng)因子抗體 | 親脂性蛋白B抗體 |
血管緊縮素樣蛋白1抗體 | 甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體 |
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human | 小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163 淋巴瘤細胞,YAC-1細胞 RSMC細胞,大鼠主動脈平滑肌細胞 | 人肺細胞;HLF-a |
人膀胱基質(zhì)成纖維細胞RNAHBdSF miRNA5 μg | Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人急性T淋巴細胞性白血病細胞;I 2.1(CRL-2572) | 人少突膠質(zhì)前體細胞(懸浮生長)總RNAHOPC-os NA |
T24細胞,人膀胱移行細胞癌細胞 大鼠肝癌細胞(wistar 大鼠),CBRH7919細胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)元 | 小鼠真皮毛乳頭原代細胞電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體 |
HPB-ALL(懸浮) T細胞白血病 | 人胚腎細胞(亞系克隆);FIP293 人腎管狀上皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-R039大鼠胃粘膜上皮細胞培養(yǎng)基100mL |
人B淋巴母細胞;HMy2.CIR | 天門冬β羥化酶抗體 |
鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 | 人肝實質(zhì)細胞培養(yǎng)基 100mL |
原鈣粘附蛋白20抗體 | 酸脫氫酶復(fù)合物X蛋白抗體 |
類固醇受體激活蛋白3抗體 | A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 Human |