化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
小鼠小梁網(wǎng)原代細胞
小鼠小梁網(wǎng)細胞分離自眼球組織；小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴展而成，覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用；小梁網(wǎng)細胞內(nèi)有特定的遞質(zhì)和肽受體，其中包括腎上腺素、乙酰和肽Y。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病，小梁網(wǎng)細胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一。在小梁網(wǎng)細胞中，一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細胞內(nèi)信號傳導機制，小梁網(wǎng)細胞可合成不同類型的細胞外基質(zhì)蛋白以及金屬蛋白酶。形態(tài)學觀察可見，剛從組織塊長出的原代細胞，形態(tài)各異，多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細胞有胞突，核橢圓形，胞體肥大，胞漿豐富，且可見吞噬顆粒。隨著細胞的增生及相互融合為單層，細胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失，排列緊密呈類似上皮細胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮，包膜清晰。
英文名稱 | Mouse Trabecular Meshwork Cells | 組織來源 | 眼球 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7371 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠小梁網(wǎng)細胞
組織來源：眼球
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠小梁網(wǎng)采用組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠小梁網(wǎng)經(jīng)NSE（元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1 | 酸化干擾素α受體抗體 |
苯乙甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 | 20號染色體開放閱讀框62抗體 |
EB病毒核抗原-3A抗體 | 原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 |
酸化著絲粒蛋白A | 蓬亂蛋白2抗體 |
鈣調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體 | 酸化三羥基三甲基A還原酶抗體 |
人肺動脈內(nèi)皮細胞(HPAEC) ( 5×105 ) | NHDF-c adult 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自成年捐獻者 500,000cells 成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
內(nèi)臟脂肪細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細胞裂解液 (陽性對照) |
BEL-7404(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL 人成骨肉瘤細胞;Saos-2 | SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
ECE2 Others Human 人 ECE-2 人細胞裂解液 (陽性對照) | PLK1 Others Human 人 PLK1 / PLK-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-H023人甲狀腺濾泡上皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠小梁網(wǎng)原代細胞原活化蛋白激酶組織蛋白1抗體 |
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽) |
人導管癌細胞;HCC38 | 人脈絡(luò)絲表皮細胞 (HCPEpiC)( 5×105 ) 人臍帶血單個核細胞 Saos-2，人成骨肉瘤細胞 |
WPMY-1人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞 WPMY-1 of normal human prostate somal immortalized cell DMEM+5%FBS | 鈣粘附蛋白9抗體 |
上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體 | REG3B Others Mouse 小鼠 REG3B / Pap1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體 | 母細胞瘤源性分泌蛋白抗體 |
糖皮質(zhì)激素誘導轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 | 人肺動脈內(nèi)皮細胞(HPAEC) ( 5×105 ) |
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