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詳細(xì)介紹
小鼠小腸Cajal間質(zhì)原代細(xì)胞
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過程，同時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞，是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號傳導(dǎo)細(xì)胞，與肌細(xì)胞以及末梢元有著緊密的關(guān)系，具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術(shù)，清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu)；應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù)，發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白；利用電生理技術(shù)，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關(guān)。多年來，學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制。
英文名稱 | Mouse Small Intestine Cajal Mesenchymal Cells | 組織來源 | 小腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7585 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞
組織來源：小腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
CM-H107人軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 核膜糖蛋白210抗體 |
tRNA異亮連接酶抗體 | 嘧啶P450 4A1抗體 |
毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 | 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
元，肌肉特異性烯醇化酶抗體 | 橋粒斑菲素蛋白1抗體 |
雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 | 甲胎蛋白單克隆抗體（包被） |
Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 | 人腦瘤細(xì)胞;SF17 |
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7 急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞，MOLT-4細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞，大鼠心肌細(xì)胞 | C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 Rattus |
酶(含100mL 酶解緩沖液) 10mL | IL7 Protein Human 重組人 IL7 / ierleukin 7 蛋白 |
J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞 | CL-0282HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
FaDu人咽鱗癌細(xì)胞 FaDu human pharyngeal squamous cell carcinoma MEM(GIBCO)+10%FBS | 小鼠小腸Cajal間質(zhì)原代細(xì)胞低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 |
恒河猴腎細(xì)胞;MMK2 | CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
IL18R1 Others Human 人 IL18R1 / CD218a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | IR983F(大鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
786-0 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 | 糖0脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 |
鈣激活氯離子通道4蛋白抗體 | 人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901] |
原鈣粘蛋白γA1抗體 | 表皮生長因子受體3抗體 |
酪蛋白激酶1γ2抗體 | Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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