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詳細(xì)介紹
小鼠外周血中性粒原代細(xì)胞
小鼠外周血粒細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞是一類無色、球形、有核的血細(xì)胞。白細(xì)胞不是一個(gè)均一的細(xì)胞群，根據(jù)其形態(tài)、功能和來源部位可以分為三大類：粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，其中粒細(xì)胞又可根據(jù)胞質(zhì)中顆粒的染色性質(zhì)不同，分為粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞和嗜堿粒細(xì)胞三種。粒細(xì)胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細(xì)小的（0.2～0.4微米）淺紅或淺紫色的顆粒。細(xì)胞核呈桿狀或2～5分葉狀，葉與葉間有細(xì)絲相連。粒細(xì)胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。粒細(xì)胞來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的細(xì)顆粒。這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過氧化酶、、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細(xì)胞的吞噬和消化功能有關(guān)。粒細(xì)胞在血液的非特異性免疫中起著十分重要的作用，它處于機(jī)體抵御微生物病原體，特別是在化膿性細(xì)菌入侵的第一線，具有很強(qiáng)的吞噬活性，可吞噬細(xì)菌、衰老的紅細(xì)胞、抗原一抗體復(fù)合物和壞死的細(xì)胞等。粒細(xì)胞內(nèi)含有大量溶酶體酶，因此能將吞噬入細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌和組織碎片分解。當(dāng)粒細(xì)胞吞噬數(shù)十個(gè)細(xì)菌后，自身發(fā)生解體，所釋出的各種溶酶體酶類能溶解周圍組織而形成膿液。粒細(xì)胞是人體內(nèi)壽命短的細(xì)胞，一般體外培養(yǎng)12-24h內(nèi)活性穩(wěn)定，48h活性下降，96h基本死亡。
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Neutrophil Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7466 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠外周血中性粒細(xì)胞
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血粒采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血粒經(jīng)瑞氏染色法，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
A-427細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 小鼠成纖維細(xì)胞,L929細(xì)胞 CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 核孔復(fù)合體蛋白88抗體 |
TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 | 嘧啶P450 2R1抗體 |
慢性淋巴細(xì)胞白血病缺失基因6蛋白抗體 | 低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體 |
營養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 | 淀粉抗體 |
嘧啶細(xì)胞核蛋白1抗體 | 甲羥戊酸激酶抗體 |
RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | HT1080 人成纖維肉瘤細(xì)胞 |
UM-UC-3人膀胱移行細(xì)胞癌 UM-UC-3 human bladder ansitional cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS | FIGF Protein Mouse 重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
直腸粘膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人肺腺癌細(xì)胞;Calu-3 |
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L1 | 人晶狀體上皮細(xì)胞cDNAHLEpiC cDNA |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B 人卵巢癌細(xì)胞，SK-OV-3[SKOV-3]細(xì)胞 BT549(管癌細(xì)胞) | 小鼠外周血中性粒原代細(xì)胞低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體 |
胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | WISH(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 |
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CM-R021大鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
K562/Adr 人白血病阿耐藥株 | 糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體 |
鈣激活鉀通道蛋白4抗體 | CM-H130人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
原鈣粘蛋白β7抗體 | 表皮生長因子抗體 |
酪羥化酶抗體 | RM-1(小鼠前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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