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詳細(xì)介紹
小鼠外周血單個(gè)核原代細(xì)胞
小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）即外周血中具有單個(gè)核的細(xì)胞，包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因?yàn)檠褐懈饔行纬煞值谋戎卮嬖诓町?，因此得以分離出不同的細(xì)胞。
英文名稱 | Mouse Peripheral Blood Mononuclear Cells | 組織來源 | 外周血 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7573 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞
組織來源：外周血
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單個(gè)核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血單個(gè)核經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
NCI-H157細(xì)胞，人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 小鼠肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 核孔蛋白50抗體 |
Toll樣受體5抗體 | 嘧啶P450 2B6抗體 |
麥芽糖結(jié)合蛋白抗體 | 低分子量絲蛋白抗體 |
激酶CERK抗體 | 羥類固醇脫氫酶17β抗體 |
β4抗體 | 甲基轉(zhuǎn)移酶cyt-19抗體 |
RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | 彈(含100mL酶解緩沖液) 10mL |
SGC-7901人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBS | IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞HCPEpiC | 牦牛皮膚細(xì)胞;BMU-S1 |
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO | 人胚腎細(xì)胞(亞系克隆);FIP293 |
DMF7細(xì)胞，雙位點(diǎn)HC-KIT受體細(xì)胞株 人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MDA-MB-435細(xì)胞 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-sf | 小鼠外周血單個(gè)核原代細(xì)胞低分子量絲蛋白抗體 |
人前列腺癌細(xì)胞;LNCaP | PLA2G12B Others Mouse 小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
MDA-MB-453細(xì)胞，癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE 450細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414) | 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL1 | 糖基轉(zhuǎn)移酶25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 |
鈣激活蛋白酶14抗體 | FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白 |
原鈣粘蛋白β2抗體 | 表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體 |
酪酸酶受體相互作用蛋白Liprin α1抗體 | RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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