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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠腎臟巨噬采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠腎臟巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠腎臟巨噬原代細胞 | 組織來源 | 腎組織 |
英文名稱 | Mouse Renal Macrophage Cells | 貨號 | YS-01X7566 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠腎臟巨噬細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應(yīng)。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
NCI-H1975人肺腺癌細胞 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1975 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS | 核干細胞因子抗體(核苷酸結(jié)合蛋白3) |
TEX261蛋白抗體 | 嘧啶C氧化酶蛋白5B抗體 |
單克隆抗體 | 蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 |
細胞突觸蛋白PCLO抗體 | 淺表層粘膜蛋白多糖抗體 |
星形細胞瘤高表達蛋白抗體（環(huán)指蛋白100） | 脊索生成素樣蛋白1抗體 |
ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 人角膜內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL |
B95-8細胞，產(chǎn)EBV的絨猴白細胞 A549(人肺腺癌細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 | EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) |
小鼠角膜成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | IL21R Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
MOLT-4 人急性淋巴母細胞白血病細胞 | 人主動脈內(nèi)皮細胞cDNAHAEC cDNA |
OPM-2-CMV-EGFP(穩(wěn)定株)人骨髓瘤細胞 OPM-2-CMV-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活) | 小鼠腎臟巨噬原代細胞蛋白質(zhì)酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 |
CL-0221SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞)5×106cells/瓶×2 | TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照) |
IL12A&IL27B Others Human 人 IL12A & IL27B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-R012大鼠肺動脈成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
NCI-H520(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 唐氏綜合征細胞粘附分子抗體 |
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激酶IG抗體 | 人臍靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL |
原腸胚雙向形成相關(guān)蛋白抗體 | 苯乙甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 |
酪蛋白激酶受體B2抗體 | ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
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