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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的小鼠卵巢微血管內(nèi)皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的小鼠卵巢微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 小鼠卵巢微血管內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 卵巢 |
英文名稱 | Mouse Ovarian Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8512 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠卵巢微血管內(nèi)皮細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側發(fā)育（右側已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構，而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結締組織。卵巢的內(nèi)部結構可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結締組織構成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結締組織構成，其中有許多血管、淋巴管和。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數(shù)量極多，成網(wǎng)狀分布。管壁由一層內(nèi)皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的微血管由一個內(nèi)皮細胞圍成管腔，較粗的微血管由2-3個內(nèi)皮細胞圍成。分布于肌肉組織、組織和結締組織中的微血管，內(nèi)皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續(xù)微血管。血管內(nèi)皮細胞在器官和組織的結構和功能上起著非常重要的作用。并與多種疾病的發(fā)生與發(fā)展有關。近年來血管內(nèi)皮細胞在炎癥、休克等一系列病理生理改變中的重要性愈來愈受到人們的重視。研究發(fā)現(xiàn)，不同來源的內(nèi)皮細胞在生物學特征、結構和功能等方面均存在一定差別，而同是微血管內(nèi)皮細胞，它們又存在器官和組織的特異性。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳2-3代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠卵巢微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
腎成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 異檸檬酸脫氫酶1抗體 |
前列腺相關P抗原家族成員1抗體 | 促上腺皮質(zhì)激素釋放激素結合蛋白抗體 |
富含亮跨膜纖連蛋白3抗體 | 膜型絲蛋白酶2抗體 |
胰羧肽酶B1抗體 | 多巴胺受體D3抗體 |
富含半蛋白結合蛋白抗體 | HER2受體單克隆抗體 |
PDE1B Others Human 人 PDE1B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | LTEP-a-2(人肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細胞裂解液 (陽性對照) |
犬腎細胞系/IgR;MDCK/IgR | CCL1 Others Mouse 小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FAS Others Mouse 小鼠 FAS / TNFRSF6 / CD95 人細胞裂解液 (陽性對照) | ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HCC38(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 前脂肪細胞培養(yǎng)基PAM | NHDF adult Pellet 正常人皮膚成纖維細胞團塊(捐獻者) > 1 mio.cells CCCSCK |
CM-H133人視網(wǎng)膜muller細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠卵巢微血管內(nèi)皮原代細胞膜型絲蛋白酶2抗體 |
NHEM-c M2 adult 正常人表皮黑素細胞(NHEM)成年捐獻者(M2培養(yǎng)液中培養(yǎng)) 500,000cells 胎盤羊膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CM-R008大鼠支氣管成纖維細胞培養(yǎng)基100mL |
BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1 | 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4 白血病原髓細胞，HL-60細胞 Dami(巨核細胞白血病細胞) |
CPB2 Others Mouse 小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 11號染色體開放閱讀框77抗體 |
肺Kruppel樣因子抗體 | CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細胞裂解液 (陽性對照) |
調(diào)節(jié)中心體分離早期相關激酶BORA抗體 | 腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體 |
G蛋白偶聯(lián)受體33抗體 | PDE1B Others Human 人 PDE1B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
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