詳細介紹
小鼠頜下腺上皮原代細胞
小鼠頜下腺上皮細胞分離自頜下腺組織;頜下腺是下頜部的唾液腺,左右各一個。頜下腺屬于唾液腺的一種,主要的功能就是分泌唾液。機體共有三大唾液腺,包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方,接近下頜骨彎曲角附近,所以也叫下頜下腺(下頜骨下方的唾液腺),左右各一,由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管,主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細胞是一種高度分化的上皮細胞,在體外難以長期存活和保持分化狀態(tài);頜下腺的主要病理變化有:①頜下腺炎;②頜下腺囊腫;③頜下腺腫;④頜下腺結(jié)石。
英文名稱 | Mouse Submandibular Gland Epithelial Cells | 組織來源 | 頜下腺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7078 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:小鼠頜下腺上皮細胞
組織來源:頜下腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的小鼠頜下腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的小鼠頜下腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | α酶重鏈H4抗體 |
原鈣粘蛋白13抗體 | 肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 |
酸化粘著斑激酶抗體 | 干擾素誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體 |
6號染色體開放閱讀框81抗體 | β葡聚糖受體抗體 |
1號染色體開放閱讀框130抗體 | 17-β-羥脫氫酶6抗體 |
DMP1 Others Human 人 DMP1 人細胞裂解液 (陽性對照) | EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人癌細胞;MDA-MB-157 | PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人細胞裂解液 (陽性對照) |
TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 NCI-H1755 [H1755](人肺癌細胞) | SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照) |
THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細胞裂解液 (陽性對照) | NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-M036小鼠小腸血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠頜下腺上皮原代細胞干擾素誘導(dǎo)GTP結(jié)合蛋白MX2抗體 |
PTGS2 Others Human 人 PTGS2 / COX2 / PGHS-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 人腎癌細胞;A498 |
人表皮黑色素細胞-深色素cDNAHEM-d cDNA | SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌細胞) |
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細胞株 小細胞肺癌細胞,LIEP-P細胞 DT40(雞淋巴瘤細胞) | CD3抗體 |
LRRC39蛋白抗體 | COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細胞裂解液 (陽性對照) |
酸化T淋巴細胞受體抗體 | 蛋白多糖4/黑色素瘤相關(guān)蛋白抗體 |
G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)突增生蛋白2抗體 | DMP1 Others Human 人 DMP1 人細胞裂解液 (陽性對照) |