腺苷脫氨酶（EC 3.5.4.4）是嘌呤代謝中的關(guān)鍵酶，在人類正常免疫功能中發(fā)揮重要作用。 腺苷脫氨酶（ADA）缺乏是重癥聯(lián)合免疫缺陷（SCID）的原因之一，而在患有結(jié)核病和免疫相關(guān)疾病的患者中，ADA水平升高已被觀察到。BioAssay Systems的DADA-100試劑盒提供了一種便捷的熒光法檢測(cè)生物樣本中腺苷脫氨酶活性的方法。在此檢測(cè)中，釋放的氨與試劑發(fā)生反應(yīng)，熒光強(qiáng)度在λex/em = 415/475 nm處的增加與酶活性成正比。

作為BioAssay Systems在中國的區(qū)域總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦BioAssay Systems銷售產(chǎn)品腺苷脫氨酶測(cè)定試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

主要特點(diǎn)

- 快速且安全。檢測(cè)可在50分鐘內(nèi)完成。非放射性檢測(cè)。

- 靈敏且準(zhǔn)確。96孔板檢測(cè)的線性檢測(cè)范圍為0.3至30 U/L腺苷脫氨酶。

- 便捷且高通量。均質(zhì)“混合-孵育-測(cè)量"型檢測(cè)。可輕松自動(dòng)化，每天可檢測(cè)數(shù)千個(gè)樣本。

應(yīng)用

- 用于定量檢測(cè)生物樣本中腺苷脫氨酶的酶活性。

試劑盒組成（96孔板，100次檢測(cè)）

- 檢測(cè)緩沖液：4 mL 20 mM

- 標(biāo)準(zhǔn)品：50 uL

- 5 mM底物：200 uL

- 檢測(cè)試劑：5 mL

儲(chǔ)存條件

- 試劑盒在室溫下運(yùn)輸。收到后將所有組分存于-20°C。

- 保質(zhì)期：收到后6個(gè)月。

注意事項(xiàng)

- 試劑僅供研究使用。使用試劑時(shí)應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室試劑的常規(guī)預(yù)防措施。請(qǐng)參閱材料安全數(shù)據(jù)表以獲取詳細(xì)信息。

操作程序

- 本檢測(cè)基于動(dòng)力學(xué)反應(yīng)。為確保孵育時(shí)間一致，向樣本中加入工作試劑（WR）應(yīng)迅速，混合應(yīng)簡(jiǎn)短但充分。建議使用多通道移液器。檢測(cè)可在室溫下進(jìn)行。

試劑準(zhǔn)備

- 在檢測(cè)前，將所有組分平衡至室溫，并在打開前短暫離心試管。每次檢測(cè)運(yùn)行應(yīng)新鮮配制工作試劑（WR）。

酶準(zhǔn)備

- 酶應(yīng)在酶緩沖液中制備，例如200 mM磷酸鉀（pH 7.4）中含0.05%牛血清白蛋白（BSA）。以下協(xié)議針對(duì)牛小腸腺苷脫氨酶進(jìn)行了優(yōu)化。如果使用其他酶，建議您通過實(shí)驗(yàn)確定每孔使用的最佳酶量。

反應(yīng)準(zhǔn)備

1. 將每個(gè)樣本的10 uL分別移至板的不同孔中。

2. 通過將每孔的2 uL 5 mM底物和40 ?L檢測(cè)緩沖液混合，為所有樣本孔準(zhǔn)備足夠的工作試劑（WR）。

3. 通過向所有樣本孔中加入40 uL工作試劑（WR）啟動(dòng)反應(yīng)。在室溫下孵育反應(yīng)30分鐘。

4. 向所有孔中加入50 uL檢測(cè)試劑。輕拍板以混合并孵育20分鐘。在λex/em = 415/475 nm處測(cè)量熒光強(qiáng)度。

所需材料（但未提供）

- 移液裝置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如Corning Costar）、離心管和酶標(biāo)儀。

示例：

在室溫下，使用200 uM腺苷檢測(cè)了牛小腸來源的不同量的腺苷脫氨酶（ADA），檢測(cè)時(shí)間為30分鐘。

文獻(xiàn)參考：

1. Xu, Z., Geng, L., Guo, L., Song, H., Pan, J., Shen, H., & Wang, S.(2022). Increased serum adenosine deaminase activity in patients with adult-onset Still's disease. BMC immunology, 23(1), 4.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774.

BioAssay Systems是一家位于美國北加州灣區(qū)的高新技術(shù)生物技術(shù)公司，專注于研發(fā)、生產(chǎn)和銷售高品質(zhì)的生化檢測(cè)試劑盒，產(chǎn)品種類齊全，主要用于科學(xué)研究和生物醫(yī)藥開發(fā)，以滿足生命科學(xué)行業(yè)日益增長的需求。BioAssay Systems在現(xiàn)代藥物發(fā)現(xiàn)領(lǐng)域擁有超過50年的豐富經(jīng)驗(yàn)，已經(jīng)開發(fā)了超過250種用于藥物發(fā)現(xiàn)和生命科學(xué)研究的檢測(cè)試劑盒。產(chǎn)品主要包括：1.血液尿液化學(xué)；2.酶活性測(cè)定；3.能量代謝；4.氧化應(yīng)激；5.高通量HTS試劑；6.陰陽離子檢測(cè)。

作為BioAssay Systems在中國區(qū)域的代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的BioAssay Systems產(chǎn)品。

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