腺苷脱氨酶（EC 3.5.4.4）是嘌呤代谢中的关键酶，在人类正常免疫功能中发挥重要作用。 腺苷脱氨酶（ADA）缺乏是重症联合免疫缺陷（SCID）的原因之一，而在患有结核病和免疫相关疾病的患者中，ADA水平升高已被观察到。BioAssay Systems的DADA-100试剂盒提供了一种便捷的荧光法检测生物样本中腺苷脱氨酶活性的方法。在此检测中，释放的氨与试剂发生反应，荧光强度在λex/em = 415/475 nm处的增加与酶活性成正比。

作为BioAssay Systems在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BioAssay Systems销售产品腺苷脱氨酶测定试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

主要特点

- 快速且安全。检测可在50分钟内完成。非放射性检测。

- 灵敏且准确。96孔板检测的线性检测范围为0.3至30 U/L腺苷脱氨酶。

- 便捷且高通量。均质“混合-孵育-测量"型检测?？汕崴勺远?，每天可检测数千个样本。

应用

- 用于定量检测生物样本中腺苷脱氨酶的酶活性。

试剂盒组成（96孔板，100次检测）

- 检测缓冲液：4 mL 20 mM

- 标准品：50 uL

- 5 mM底物：200 uL

- 检测试剂：5 mL

储存条件

- 试剂盒在室温下运输。收到后将所有组分存于-20°C。

- 保质期：收到后6个月。

注意事项

- 试剂仅供研究使用。使用试剂时应遵循实验室试剂的常规预防措施。请参阅材料安全数据表以获取详细信息。

操作程序

- 本检测基于动力学反应。为确保孵育时间一致，向样本中加入工作试剂（WR）应迅速，混合应简短但充分。建议使用多通道移液器。检测可在室温下进行。

试剂准备

- 在检测前，将所有组分平衡至室温，并在打开前短暂离心试管。每次检测运行应新鲜配制工作试剂（WR）。

酶准备

- 酶应在酶缓冲液中制备，例如200 mM磷酸钾（pH 7.4）中含0.05%牛血清白蛋白（BSA）。以下协议针对牛小肠腺苷脱氨酶进行了优化。如果使用其他酶，建议您通过实验确定每孔使用的最佳酶量。

反应准备

1. 将每个样本的10 uL分别移至板的不同孔中。

2. 通过将每孔的2 uL 5 mM底物和40 ?L检测缓冲液混合，为所有样本孔准备足够的工作试剂（WR）。

3. 通过向所有样本孔中加入40 uL工作试剂（WR）启动反应。在室温下孵育反应30分钟。

4. 向所有孔中加入50 uL检测试剂。轻拍板以混合并孵育20分钟。在λex/em = 415/475 nm处测量荧光强度。

所需材料（但未提供）

- 移液装置及配件（例如多通道移液器）、黑色平底96孔板（例如Corning Costar）、离心管和酶标仪。

示例：

在室温下，使用200 uM腺苷检测了牛小肠来源的不同量的腺苷脱氨酶（ADA），检测时间为30分钟。

文献参考：

1. Xu, Z., Geng, L., Guo, L., Song, H., Pan, J., Shen, H., & Wang, S.(2022). Increased serum adenosine deaminase activity in patients with adult-onset Still's disease. BMC immunology, 23(1), 4.

2. Sugawara, K, Oyama, F. (1981). Fluorgenic reaction and specific microdetermination of ammonia. J. Biochem. 89, 771–774.

BioAssay Systems是一家位于美国北加州湾区的高新技术生物技术公司，专注于研发、生产和销售高品质的生化检测试剂盒，产品种类齐全，主要用于科学研究和生物医药开发，以满足生命科学行业日益增长的需求。BioAssay Systems在现代药物发现领域拥有超过50年的丰富经验，已经开发了超过250种用于药物发现和生命科学研究的检测试剂盒。产品主要包括：1.血液尿液化学；2.酶活性测定；3.能量代谢；4.氧化应激；5.高通量HTS试剂；6.阴阳离子检测。

作为BioAssay Systems在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BioAssay Systems产品。

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