天然AAV1-AAV9、AAVrh10、AAVDJ衣壳（1E+09-1E+10衣壳）和变性AAV8衣壳（1E+09-1E+10衣帽，在样品缓冲液中于95°C变性10分钟）的斑点印迹分析。

在室温下，用PBST（PBS+0.1%吐温20）中的5%干乳将硝化纤维膜封闭1小时。将抗AAV8（完整颗粒）小鼠单克隆抗体ADK8在封闭缓冲液（抗体浓度100 ng/ml）中稀释，并在室温下孵育1小时。羊抗小鼠IgG-HRP的第二抗体也在封闭缓冲区（抗体浓度200 ng/ml）中溶解，并在RT下孵育一小时。使用Pierce?ECL Plus Western Blotting Substrate通过化学发光检测可见条带。

用于表征感染的不同阶段，对AAV组装过程的分析非常有用。ADK8与AAV1、AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80、空衣壳和全衣壳特异性反应。识别组装衣壳的构象表位。预测的结合位点：残基586-LQQQNT-591（Gurda等人，2012）。该抗体不能用于使用变性条件的免疫印迹。

作为PROGEN在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐PROGEN销售产品抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体：

数量10 微克

抗体类型 单克隆

宿主 小鼠

亚型 IgG2a kappa

偶联物 未偶联

应用 斑点印迹、ELISA、ICC/IF、IP、中和试验

纯化 亲和色谱

反应性 AAV3, AAV7, AAV8, AAVrh10, AAVrh74, Anc80

无反应性 AAV1, AAV2, AAV4, AAV5, AAV6, AAV9, AAV11, AAV12, AAVDJ

重悬前储存 直至标示的有效期前，储存于2-8°C

重悬后储存 可在2-8°C下储存长达3个月；长期储存需分装于-20°C；避免冻融循环

用途 仅供研究使用

克隆号 ADK8

免疫原 AAV8衣壳

浓度 用200微升PBS重悬后浓度为50微克/毫升

配方 冻干；用200微升无菌PBS重悬

结合亲和力

KD值 (AAV8) = <1.0E-12 M

KD值 (AAVrh10) = <1.0E-12 M

KD值 (AAVrh74) = <1.0E-12 M

同义词 腺相关病毒8，AAV-8

测试应用 测试稀释度

免疫细胞化学（ICC）/ 免疫荧光（IF） 依据检测而定

斑点印迹 1:100-1:500 (0.1-0.5 微克/毫升；非变性条件)

酶联免疫吸附试验（ELISA） 依据检测而定

免疫沉淀（IP） 依据检测而定

中和试验 EC50 ~14 微克/毫升（AAV3），~4 微克/毫升（AAV8） - 依据检测而定

抗AAV8、ADK8、小鼠单克隆抗体特点：

纯化、冻干

小鼠单克隆抗体

适用于斑点印迹、ELISA和中和

与AAV3、AAV7、AAV8、AAVrh10、AAVrh74和Anc80完整颗粒反应

同种型：IgG2aκ

文献参考：

Ohba K. et al. Adeno-associated virus vector system controlling capsid expression improves viral quantity and quality., iScience, 26, 106487, (2023).

Haar, J., Blazevic, D., Strobel, B., Kreuz, S. & Michelfelder, S. MSD-based assays facilitate a rapid and quantitative serostatus profiling for the presence of anti-AAV antibodies. Mol. Ther. - Methods Clin. Dev. 25, 360–369 (2022).

PROGEN公司成立于1983年，总部位于德国海德堡，由海德堡大学教授联合创办，体外诊断试剂的制造商和供应商，也是德国癌症研究中心的合作伙伴。 主要产品线： 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒）检测试剂盒等。

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