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Hela-GFP人子宮頸癌細(xì)胞綠色熒光株

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更新時間:2024/07/28 16:58:24瀏覽次數(shù):915

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨
Hela-GFP人子宮頸癌細(xì)胞綠色熒光株
該細(xì)胞公司*,培養(yǎng)狀態(tài)下的,現(xiàn)貨一周供應(yīng),我公司可100%保障該細(xì)胞的質(zhì)量,代數(shù)年輕活性好,不含有細(xì)菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體 。

詳細(xì)介紹

Hela-GFP人子宮頸癌細(xì)胞綠色熒光株

產(chǎn)品名稱: 人子宮頸癌細(xì)胞綠色熒光株Hela-GFP

英文名稱:Hela-GFP

產(chǎn)品規(guī)格: 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

試劑級別: 試劑級

產(chǎn)品產(chǎn)地: 中國

價    格: 電詢元

保存與運輸: 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃

現(xiàn)貨狀態(tài): 現(xiàn)貨

特點:

1) 特異性強(qiáng):只對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行有效識別和殺滅,而不傷害正常組織和細(xì)胞;抗瘤譜廣。 

2) 對體內(nèi)各種腫瘤細(xì)胞均能有效治療。 

3) 安全性好,除可能出現(xiàn)的發(fā)熱、少量出血外,無其他不良反應(yīng)。 

Hela-GFP人子宮頸癌細(xì)胞綠色熒光株

培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO,,添加NaHCO3 1.5g/L,丙酮酸鈉 0.11g/L);優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

細(xì)胞注意事項:

1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2.先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(4h左右),穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。

3.靜置后鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。

4.  懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞瓶內(nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi),1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,培養(yǎng)基上清可備用,管底細(xì)胞沉淀用培養(yǎng)基重懸。鏡檢時若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞瓶內(nèi)培養(yǎng);若密度未超過80%,細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),待達(dá)到80%時再正常傳代。備注:聚團(tuán)生長慢,有密度依賴,必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng),3天一次半量換液一次,1-2周傳代一次。

貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。備注:細(xì)胞貼壁慢,傳代后細(xì)胞放2天不動。

5.細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補(bǔ)加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,一半用客戶自備的培養(yǎng)基,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。

 

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