口蹄疫病毒A型核酸检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

产品规格：50T/盒；

 保存条件：避光 -20度 保存。

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口蹄疫病毒A型核酸检测试剂盒

以下是我司提供的部分PCR产品

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将氧化嘅抗体过PBS戥头嘅Sephadex G25 PD10预装柱（Pharmacia），令之与过碘酸钠分开。有冇收集蛋白峰。
4）向抗体理中加biotinLChydrazide（Pierce）至终浓度5mmol/L，整死捞浪器上室温哺育1h。
5）用含0.02% NaN3嘅PBS戥头Sephadex G25预装柱，将生物斋识认嘅抗体分子过柱与游离嘅生物斋分开。有冇收集蛋白峰，摆喺-20℃。
2.生物斋识认DNApian段作为将与抗体偶联嘅报告DNApian段，应确保喺对量抗原来源嘅机体DNA中无同源序列，如可选用大肠杆菌嘅序列作为报告DNA去检测人源嘅标本。DNApian段大小为300-500bp，生物斋识认可采用PCR方法，根据报告DNA嘅核苷酸序列合成一对引子，其中一个引子嘅5′四碱基上带有生物斋识认。
1）喺0.5ml PCR理中将下列试剂捞：
试剂添加量终浓度10×PCR缓冲液10μl1×25mmol/L 4dNTP混合物8μl 0.2mmol/L
五十μmol/L生物斋识认嘅上游引子1μl 0.5μmol/L
五十μmol/L下游引子1μl 0.5μmol/L
15mmol/L MgCl21μl 15mmol/L模板DNA1μl<1μg？Taq？DNA聚合酶1μl5U加H2O至100μl
2）捞匀后上面覆盖液体石蜡。
3）95℃加热5min，然后喺PCR仪上按下列程式扩增：94℃1min；55℃1min；72℃1min；40个循环。zui后72℃延伸10min。
4）加等量酚lv仿抽提，跟住加10μl 3mol/L KAc，250μl无水乙醇，置-70℃30min。
5）离心沉淀DNApian段，用70%乙醇洗一次。
6）将沉淀糠后重溶于TE缓冲液，摆喺-20℃。
3.制备抗体亲和斋DNA复合物将生物斋识认嘅抗体与亲和斋按等分子浓度捞于含有1mg/ml BSA嘅PBS中，室温哺育30min，再加两倍分子浓度嘅生物斋识认嘅DNApian段，继续哺育30min，zui后加10倍分子浓度嘅生物斋，将亲和斋分子上嘅结合位饱和。，继续哺育30min，zui后加10倍分子浓度嘅生物斋，将亲和斋分子上嘅结合位饱和。
将铁嘅抗体过PBS皝头嘅Sephadex G25 PD10预装柱（Pharmacia），令之与过碘酸衲分。有冇收白浑峰。
四）向抗体理中加biotinLChydrazide（Pierce）终浓5mmol /孔，整死捞浪器上室温育1h。
五）以含。.02% NaN3嘅PBS皝头Sephadex G25预装柱，将生斋识嘅抗体狡过柱与游嘅物斋分。有冇收白浑峰，设二十喺真。。
二.生斋识DNApian段为将与抗体偶联嘅告DNApian段，宜保喺谓量抗原本嘅各DNA中无源序，如可用大肠杆菌嘅序为报DNA往检人源嘅标本。DNApian段大为300-500bp，生斋识可用PCR法，据报DNA嘅核苷酸序合成一对归，其一归嘅五′四碱基上带有生斋识。
一喺。）.5ml PCR理以下列试剂捞救：
试剂添量终浓十×PCR缓冲液十μl1×25mmol /孔4dNTP火矢八μ？。.2mmol /孔
五十μmol /孔生斋识嘅流归一μ？。.五μmol /孔
五十μmol /上下一μ归州。.五μmol /孔
15mmol /孔MgCl21μ？15mmol /孔楷DNA1μ< 1μ强。？Taq？DNA聚合酶1μl5U加H2O至百μ。
二）捞匀后覆石蜡汁。
三）95真火5min，然后喺PCR仪上按下列程氏颇益：94真1min；真1min五十；真1min七十二；四十个循环。后七十二真度10min。
四）加等者lv仿抽提，与住加十μ？3mol想孔KAc，250μ无水乙醇。，置30min七十真。。
五）心下DNApian段，以70%乙醇洗一。
六）将下糠而重溶于TE缓冲液兮，设喺二真。。
三.制备抗体亲斋DNA旧物以物斋识嘅抗体与亲斋按等法浓捞于含1mg / ml BSA嘅PBS中，室温育30min，再加两倍法浓嘅物斋识嘅DNApian段，又育30min，后加十倍浓嘅物斋法，将亲斋法上嘅合位饱。