甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

产品规格：50T/盒；

 保存条件：避光 -20度 保存。

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甲型H1N1流感病毒核酸检测试剂盒

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铁蛋白嘅提取
1）配制2%镪水铵液，并以1mol/L嘅NaOH或者HCl调pH值，啱啱为5.85。攞1g铁蛋白溶于100ml嘅2%硫酸铵液中。
2）加20%硫酸镉，令zui终浓度为5%，捞匀，4℃过夜。
3）1500g离心（4℃）2h，去上清。仍加2 %镪水铵至100ml，捞匀，离心，抹得甩不纯沉渣。
4）于上清液中重新加20%硫酸镉，重复步骤⑵，离心，去上清。
5）检查沉渣，置显微镜下检查，应具有典型嘅黄褐色结晶，结晶为六角形，双一四点结构，如结晶唔典型，应继续重复以上步骤。
6）以少量嘅蒸馏水溶解，再加50%饱和镪水铵溶液，令之沉淀，离心，去上清。
7）重复步骤⑹一次。
8）以少量蒸馏水溶解，常水透析24h后，以0.05mol/L pH7.5 PBS透析24h。
9）100000r/min离心2h，抹得甩上部冇色上清液（约3/4总量），置4℃过夜。
10）用微孔滤膜（孔径0.45μm）隔，令铁蛋白含量为65mg/ml-75mg/ml，分装，4℃保存唔冻做保存，以免铁蛋白结构遭破坏。
2.铁蛋白－抗体交联法
1）以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将铁蛋白稀释成20mg/ml-25mg/ml。
2）以一∶1000（W/W）嘅比例加XC液室温搅拌45min，离心去沉淀。
3）以0.3Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将提纯lgG衬成5mg/ml，以一∶4嘅比例（V/V）加IgG与铁蛋白－XC液，4℃搅拌48h。
4）以0.1Mol/L式碳铵溶液透析过夜，以除去多余嘅异氰酸盐，再以0.05Mol/l pH 7.5 PBS透析，令pH值恢复到生理水平。
5）超速离心以1.00×105g离心5h，去上清，沉淀以0.05Mol/L PBS悬浮，再次离心，以除去未结合嘅IgG。
6）以血清学同免疫学方法测定结合抗体嘅特异性、免疫活性与及识认效应，如果用步骤严格，结果系满意嘅。
3.铁蛋白－抗体结合物处理标本
1）将标本以5%福尔马林pH 7.2（4℃）PBS液入墙40min-60min。
2）用冻嘅PBS液洗涤，离心。
3）如系组织蚊，就喺解剖显微镜下切更忽，放入试管中，加埋铁蛋白－抗体结合物置室温20min，不时振荡，
4）以冻PBS液洗涤三次，离心。
5）沉淀以2.5%戊二醛入墙20min，以PBS洗涤。
6）再以锇酸入墙，脱水包壅。
都可以先超薄切片，再进行铁蛋白－抗体结合物染色。
唔识用如下：
1）将培养细胞以1%福尔马林PBS液入墙（4℃）。
2）PBS液洗涤离心。
3）以0.5ml，30%牛血清蛋白PBS液悬浮置入胶透析膜袋中，再将袋置于嗍水剂粉末上，对牛血清白蛋白成胶状物时，将透析袋移至2%戊二醛PBS液（pH7.5）中入墙3h。
4）拎出，切忽，以PBS液洗涤。
5）置干燥器中以矽胶糠。
6）包壅、切片、喺水上有冇收集切片置于经4%牛血清白蛋白PBS液处理嘅搂有胶膜嘅在网上（牛血清白蛋白嘅处理在于少铁蛋白结合物非特异性吸附于在网上）。
7）滴一滴铁蛋白－抗体结合物于在网上。
8）5min后，浮丝网于PBS液面，标本口当面同下，以除去多余嘅结合物。
9）冻做后，滴一滴醋酸双氧铀或者氢氧化铅以复染。
10）水洗、晾干、电镜观察。

鉄蛋白の抽出
1）2 %の強水アンモニウム液を配合し、1 ml / LのNaOHまたはHClのpH値を使用した。1 gの鉄蛋白は100 mlの2 %の硫酸アンモニウムの中に溶けます。
2）の20 %の硫酸カドミウムを加えて、zui終的な濃度を5 %とし、均等に引き揚げ、4℃で夜を過ごす。
3）150 gは心（4℃）2 h、清に行く。依然として2 %の強水アンモニウムに100 mlまで加えて、均等に引き揚げて、心を離れて、塗って純粋に沈めます。
4）上清液の中で2 %の硫酸カドミウムを加えて、ステップを繰り返して、心を離れて、清に行く。
5）沈殿を検査して、顕微鏡の下で検査をして、典型的な黄色の褐色の結晶を持つべきで、結晶は六角形で、2つの4点の構造、結晶のような典型的なように、引き続き以上の手順を続けなければなりません。
6）少量の蒸留水で溶かし、さらに50 %が飽和した強い水アンモニウム溶液を加え、沈殿させ、心を離す。
7）繰り返しのステップを一度繰り返す。
8）少量の蒸留水で溶解し、常水透析24 hの後、0.05 mml / L pH 7 PBSで透析した24 h。
9 ) 100000 / min離心2 h、上の色の上清液（約3 / 4の総量）を塗り、4℃で夜を過ごす。
10）マイクロ孔フィルタ（孔径0.45μm）を使って、鉄蛋白の含有量を65 mg / ml - 75 mg / mlとし、4℃で保存して保存し、鉄蛋白の構造が破壊されないようにする。
2 .鉄蛋白－抗体交換法
1）は、0.32 mg / L pH 9.5ホウ酸塩緩衝液を20 mg / ml - 25 mg / mlに希釈する。
2）1：1000（W / W）の割合でXC液室温度をプラスして45 minをかき混ぜて、心から沈殿します。
3）0.3 M / L pH 9.5ホウ酸塩緩衝液を5 mg / mlに引き立て、1：4の割合（V／V）にIgGと鉄卵白－XC液、4℃で48 hをかき混ぜます。
4）は、余分なシアン酸塩を除去し、0.05モル／l pH 7.5 PBSで透析して生理レベルに回復する。
5）超速度で心を離れて1.00×105 gで離心して5 h、上清に行って、沈殿して0.05モル／L PBSで浮遊して、再び心を離れて、未結合のIgGを取り除くためです。
6）血清学同免疫学の方法で測定して抗体の特異性、免疫活性と認識効果を測定します。
3 .鉄蛋白－抗体の結合物が標本を処理する
1）標本を5 %のホルマリンpH 7.2（4℃）PBS液で壁40メートル- 60 minに入る。
2）凍ったPBS液で洗濯し、心を離す。
3）蚊を組織すると、解剖顕微鏡の下でより忽然として、試験管に入れて、鉄の卵白を埋める－抗体の結合物が室温の20 minをつけて、度々振動する。
4）冷凍PBS液で3回洗濯し、心を離す。
5）沈殿して2.5 %のスピリヒドで壁に20 minを入れて、PBSで洗います。
6）また、オスル酸で壁に入って、脱水してふさぐ。
すべてを超えてスライスして、更に鉄の卵白－抗体が物を結びつけて染色することができます。
以下のように
1）培養細胞を1 %のホルマリンPBS液で壁に入れる（4℃）。
2）PBS液は心を離す。
3）は0.5 mlで、30 %の牛の血清卵白PBS液がゴム袋の袋の中に浮いて、更に袋をしゃぶる水剤の粉末の上に置いて、牛の血清の白蛋白がゴム状になったときに、透析袋を2 %のスピリヒドPBS液（pH 7）の中に壁を3 hに移す。
4）持って出て、切って、PBS液で洗う。
5）乾燥器にはシリコンの糠がある。
6）パッケージ、切片、水の上には、4 %の牛の血清白卵白PBS液の処理の接着剤を収集することができます。
1滴の鉄蛋白－抗体結合物がネット上にある。
8）5 minの後、PBS液面に浮かんで、標本口と面と向かって余分な結合物を取り除く。
9）凍結した後に、1滴の酢酸の双酸素のウランあるいは水素の酸化の炭素は回復します。
10）水洗い、干し、鏡で観察する。