人脐静脉内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人脐静脉内皮细胞分离自脐带组织；它是脐静脉的重要结构组成细胞之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构，脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉，卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中，子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管，与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近，在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2，代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘，脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。

方法简介：

公司实验室分离的人脐静脉内皮细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人脐静脉内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

CL-0347HCC38(人导管癌细胞)  FaDu(人咽鳞癌细胞)     PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 小鼠原代胃cajal间质细胞 人原代胆囊微血管内皮细胞

FSH(Follicle-stimulating hormone precursor 0.5mgFSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺激素抗原

AMPK Protein Human 重组人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白

CD38重组大鼠 SCARB3 蛋白  Protein

SPARC Protein Mouse 重组小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 (His 标签)

CAMK2B重组人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 标签) Protein

兔白细胞介素-35(IL-35)试剂盒

Rat acetylcholine (Ach) ELISA Kit 大鼠乙酰(Ach)试剂盒

Humanadeno-associatedvirus,AAVELISAKit 人腺相关病毒(AAV)试剂盒 进口分装

HumanGlycogenphosphorylaseMM,GP-MM试剂盒人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)试剂盒

组织蛋白酶G(cathepsinG)0.25单位

Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAKit人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒

植物类黄测试盒   可见分光光度法   50管/24样

植物总酚测试盒   可见分光光度法   50管/24样

植物原测试盒   可见分光光度法   50管/24样

尿酸含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样

人脐静脉内皮原代细胞植物细胞分裂素(Cytokinin)试剂盒

Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝肾微粒体抗体(LKM)试剂盒

Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 猪脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2

血液A含量荧光定量试剂盒20次

MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲状腺球蛋白(TG)试剂盒

IL18R1重组大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 标签) Protein

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

CAMKV重组人 CAMKV 蛋白 (His & GST 标签) Protein

ING5 Protein Human 重组人 ING5 蛋白 (GST 标签)

EREG Protein Mouse 重组小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 标签)

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。