人卵巢微血管内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人卵巢微血管内皮细胞分离自卵巢组织；卵巢是雌性动物的生殖器官，卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同，仅左侧发育（右侧已退化），呈葡萄状，均为处于不同发育时期的卵泡，卵泡呈黄色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢，但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构，而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官，它的外表有一层上皮组织，其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分，主要由卵泡和结缔组织构成；髓质位于中央，由疏松结缔组织构成，其中有许多血管、淋巴管和神经。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7～9微米，数量极多，成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成，厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织，其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。细的微血管由一个内皮细胞围成管腔，较粗的微血管由2～3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管，内皮细胞间为缝隙连接（缝隙宽150埃），称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现，不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别，而同是微血管内皮细胞，它们又存在器官和组织的特异性。

方法简介：

公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞采用胶原酶-蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌细胞)  人恶性黑色素瘤细胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌细胞 SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系 小鼠胚胎成纤维细胞,3T6细胞 ES-2(人卵巢透明细胞癌细胞)  叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21 小鼠原代小肠粘膜上皮细胞 兔原代肾脏巨噬细胞

Batroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白 1mgBatroxobin Protein 蛇毒巴曲酶全蛋白

IL23 Protein Human 重组人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白

LTA4H重组小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 Protein

HGF Protein Rat 重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

CALML3重组人 CALML3 蛋白 Protein

兔子白三烯B4(LTB4)ELISA 试剂盒

Human vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒

Humanai-neuroblastoma-aibody,NB-AbELISAKit 人抗神经母细胞瘤抗体(NB-Ab)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanEsogeeceptor,ER试剂盒人雌激素受体(ER)试剂盒规格：96T/48T

组织SPRK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

humanorosomucoid2,ORM2ELISAKit人类粘蛋白2(ORM2)试剂盒规格：96T/48T

溶酶体相关膜蛋白3   英文名称：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   规格：      英文缩写：   LAMP3

人乳酸脱氢酶   英文名称：   Human Lactate Dehydrogenase   规格：      英文缩写：   LDH

人   英文名称：   lysozyme   规格：      英文缩写：   LZM/LYS

甘露聚糖结合凝集素丝酸肽酶-2   英文名称：   mannan-binding lectin associated serine proteases   规格：      英文缩写：   MASP-2

人卵巢微血管内皮原代细胞小鼠A(VA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat osteonectin (ON) ELISA Kit 大鼠骨粘连蛋白(ON)试剂盒

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPαELISAKit 人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenLeinizingHormone,LH试剂盒鸡促黄体激素(LH)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞NFKAPPABP50蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit小鼠游离三甲状腺原(Free-T3)试剂盒规格：96T/48T

TGFBR2重组大鼠 TGFBR2 蛋白  Protein

GABA/BSA γ1氨基偶联牛血清白蛋白 1mgGABA/BSA γ1氨基偶联牛血清白蛋白

SERPINA6重组人 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 标签) Protein

AMPK Protein Human 重组人 AMPK (G1/B1/A2) Heterotrimer 蛋白

KIT Protein Mouse 重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白