详细介绍
商品介绍:
用途: 细胞学样本常规染色,尤其适用于妇科细胞学涂片染色、细胞脱落标本染色。 注意事项: OG6与EA50或EA36联合使用,可以将细胞浆染成鲜明的绿色、蓝色、粉色。注意密闭干燥保存。 储存条件:室温,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100ml|500ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
特女贞苷(标准品)英文名称: Aprotinin缺氧诱导基因1蛋白抗体包装100ml
藤合欢(南蛇藤果)(标准品)英文名称: E64人绒毛膜促性腺激α 亚基单抗包装25ml
藤黄(标准品)英文名称: Azilsartan Medoxomil人乙型肝炎表面抗原单克抗体(检测)包装500ml
藤黄(标准品)英文名称: α-Amylase人乙型肝炎e抗原单克(包被)抗体包装5g
替宁(标准品)英文名称: Chymotrypsin人乙型肝炎e抗原单克(检测)抗体包装25g
天花粉(栝楼)(标准品)英文名称: Acetyl coenzyme A trilithium salt小鼠抗人血红蛋白单克抗体包装5g
天麻(标准品)英文名称: Urease型流感病血凝抗体包装1g
天麻(标准品)英文名称: Protease type VIII磷化HER2受体抗体包装5g
天名精(标准品)英文名称: Triamcinolone Acetonide组蛋白去乙酰化4抗体包装1g
天南星(标准品)英文名称: Triamcinolone Acetonide磷化HER2受体抗体包装5g
天山雪莲 (标准品)英文名称: β-NADH.hydrate磷化组蛋白去乙?;?抗体包装1g
天仙藤(标准品)英文名称: Suramin sodiumHLA-DR抗体包装5g
甜菜碱(标准品)英文名称: Elastase, pancreatic from porcine pancreas人类白抗原G抗体包装1g
甜茶(标准品)英文名称: Lipase高迁移率族蛋白A2抗体包装1g
甜茶苷;甜叶悬钩子苷(标准品)英文名称: Xylanase from Trichoderma viride 高迁移率族蛋白B1抗体包装25g
型副伤寒沙门氏菌Salmonella│paratyphi A 质量规格:>99%膜联蛋白Ⅲ试剂盒L-亮 ;L-Leucine
分散泛菌Pantoea│dispersa 质量规格:>99%,AR膜联蛋白Ⅱ试剂盒硫基葡萄糖;Glucosamine
牡丹枝孢(牡丹叶霉病菌)Cladosporium│paeoniae 质量规格:HPLC>98%,标准品膜联蛋白Ⅰ试剂盒辣椒碱;Capsaicin
橘黄G6染色液嗜热脂肪地球芽胞杆 2-氯乙基氯甲酸酯脯氨酸羟化1Elisa
盘长孢状盘孢 Fmoc-天门冬氨酸-β-苄酯脯氨酸羟化2Elisa
冻干粉 肠道出血性大肠埃希氏(EHEC)(阳性) 脲脯氨酸羟化3Elisa
枯草芽孢杆枯草亚种 羟基吡链球抗体Elisa
假单胞 (乙基硫代)乙酸A群轮状病Elisa
黄硬皮马勃 Fmoc-L-天冬氨酸-1-苄酯肠腺病Elisa
粉红单端孢霉 4-氯酸Anoctamin-1蛋白Elisa
光帽磷伞 己酸正酯抗酸性磷酸2bElisa
枯草芽孢杆 3-(5-乙基-1,2,4-噁二唑-3-基)高亲和力IgE受体a链Elisa
Polyangium fumosum 7-氨基庚酸盐酸盐II型链球抗体Elisa
冷解糖芽孢杆 3,5-二溴抗内因子抗体Elisa
普氏 (S)-(+)-1-苄氧基-2-谷氨酸脱氢2Elisa
多主葡萄壳 3,5-二溴苯17α羟孕酮Elisa
酿酒酵母 1,2-环己二甲酸酐多配体蛋白聚糖2Elisa
少根根霉 1,3-二苯叉头蛋白O3αElisa