详细介绍
产品属性:
中文名称:中性红染色液(活细胞专用)
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
用途: 用于外周血细胞的活体染色,也可以用于其它活体细胞或组织的染色。 注意事项: 细胞核染成红色,细胞核中的核酸呈酸性,因此细胞核会被染成红色。由于溶酶体(lysome)中也是酸性环境,因此溶酶体也是可以被中性红染色液染成红色的。 储存条件:室温,12个月 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
牛角粉(标准品)英文名称: Laminarin from Laminaria digitataγ-谷酰转肽5轻链抗体包装5g
翁花(标准品)英文名称: Pancreatinγ-谷酰转肽7轻链抗体包装50mg
仙苷(标准品)英文名称: Papain溶体累积病相关蛋白/口吃相关蛋白抗体包装1g
杨苷(标准品)英文名称: Papain糖原合激3α+β抗体包装5g
杨梅根(标准品)英文名称: PancreatinG2期/S期应答相关蛋白1抗体包装25g
杨酯(标准品)英文名称: Pancreatin生长分化因子8/肌肉抑制抗体包装5g
蛭(蚂蟥)(标准品)英文名称: Orphenadrine citrate磷化糖原合激3α/β抗体包装25g
丝瓜甙B英文名称: β-GalactosidaseSEC63域内含蛋白1抗体包装5g
丝石竹皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖酯英文名称: Abscisic acid,S-ABAA型病H7N9 M1蛋白抗体包装1g
斯皮诺(标准品)英文名称: Abscisic acid,S-ABA人类状瘤病33 E6蛋白抗体包装5g
四氢小檗碱(标准品)英文名称: Abscisic acid,S-ABABeta基己糖苷beta亚基蛋白A链抗体包装10MG
四氢鸭脚木碱英文名称: PEPSIN磷化热休克蛋白-70抗体包装100g
松柏;4-羟基-3-氧基肉桂(标准品)英文名称: Ribonuclease A from bovine pancreas磷化热休克蛋白-70抗体包装25g
松果菊苷(标准品)英文名称: Andarine19号染色体开放阅读框38抗体包装5g
松苓新英文名称: PEPSIN乙酰肝抗体包装10mg
光滑假丝酵母Candida│glabrata 质量规格:>97%,BR末端补体复合物C5b-9试剂盒雷公藤内酯;Triptolide,14
阴沟肠杆菌Enterobacter│cloacae 质量规格:HPLC>97%,标准品膜内?;氖约梁新仿吠?Liquidambaric a
雷夫松氏菌Leifsonia│sp. 质量规格:>95%,蛋白≤0.1%膜联蛋白A2试剂盒利卡灵-B;(-)-Licarin B
中性红染色液(活细胞专用)硬结节杆 4-甲基邻苯二白关联球蛋白样受体1Elisa
鞘氨 4-氟-2-甲白关联球蛋白样受体2Elisa
*灰葡萄孢 甘油缩甲γ谷氨酰转移Elisa
粪肠球 3-溴-5-甲酸甲酯(易)酪氨酸激受体BElisa
毛霉属 环戊基苯酸β位淀粉样前体蛋白裂解2Elisa
弓形虫(GJS-3株) 盐酸特拉唑磷酸化蛋白激C亚性D型Elisa
北京掷孢酵母 2-甲氧基-6-甲基吡啶突触核蛋白βElisa
盖替隐球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮氨酸丰富重复G蛋白偶联受体5Elisa
浅灰小双孢 1-(4-吡啶基)酮激锚定蛋白4Elisa
广西腐霉 3-氨基-2-氯吡啶紧密连接蛋白4Elisa
黑曲霉 4-环己酮羧酸甲酯可溶性Klotho蛋白Elisa
空肠弯曲杆 5-氯-1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不饱和脂肪酸Elisa
近缘毛壳 3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐饱和脂肪酸Elisa
鞘氨杆 1,7-二氯-4-氧杂庚烷人可溶性EndoglinElisa
酿酒酵母 5-氯香草酸蛋白激D2Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)