详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Apilimod mesylate | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
Apilimod(STA5326)甲磺酸盐是IL-12/IL-23抑制剂,能抑制IFN-γ/LPS刺激的人PBMC产生IL-12,IC50为10nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:870087-36-8 别名:STA 5326 mesylate 纯度:99.11% 分子量:610.7 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
*发根土壤杆菌6号染色体开放阅读框50抗体Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖脂抗体(glycolipid)免疫试剂盒
尖槐藤根瘤菌1号染色体开放阅读框151抗体Human SCG2(Secretogranin II) ELISA Kit人糖盏蛋白免疫试剂盒
黑褐鹅膏菌肿瘤坏死因子受体超家族成员9抗体Human RXFP1(Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit人糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫试剂盒
高卢根瘤菌复合前列腺特异性抗原单克抗体Human RNASE(Ribonuclease) ELISA Kit人糖原磷化同工II(GP-II)免疫试剂盒
松口蘑组织蛋白z抗体Human SDH(Succinate Dehydrogenase) ELISA Kit人糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫试剂盒
鲍鱼菇2号染色体开放阅读框84抗体Human RNASEN(Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit人糖原磷化(GP)免疫试剂盒
枯草芽胞杆菌枯草亚种磷化钙/钙调依赖蛋白激2α抗体Human sdLDL(Small Dense Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人糖原合成激3(GSK-3)免疫试剂盒
樟疫霉组织蛋白A抗体Human RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA Kit人糖原合成激(GSK)免疫试剂盒
拟康宁木霉CD34抗体Human RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit人糖原合成免疫试剂盒
拟青霉周期D3抗体Human Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA Kit人糖缺失性转铁蛋白(CDT)免疫试剂盒
嗜麦芽寡养单胞菌紧密连接蛋白1抗体(C端)Human RTN4(Reticulon 4) ELISA Kit人糖皮质激受体β(GR-β)免疫试剂盒
盖氏海杆状菌转录调节因子C/EBP α 抗体Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖皮质激受体α(GR-α)免疫试剂盒
帚状曲霉核黄转运蛋白2抗体Human proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit人糖磷脂酰肌(GPI)免疫试剂盒
大肠埃希菌磷化钙介质抗体Human RARS(Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit人糖类抗原72-4(CA72-4)免疫试剂盒
粘孢白僵菌7号染色体开放阅读框26抗体Human RARα(Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit人糖类抗原50(CA50)免疫试剂盒
黄曲霉衰变加速因子CD55抗体Human PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit人糖类抗原19-9(CA19-9)免疫试剂盒
海杆状菌Marinobacter│sp. 质量规格:活:>200 NADP units/mg,BCc-fos ELISA Kit二氢欧山芹醋酯
假单胞菌Pseudomonas│sp. 质量规格:>98%,BRCDCP1试剂盒二氢鱼藤
指状青霉Penicillium│digitatum 质量规格:>96%,BRCD8分子试剂盒二氢黄连碱
IL-12/IL-23抑制剂(Apilimod mesylate)Patched/PTCH抗体包装100g
前列腺E合成抗体包装25g
过氧化物体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗体包装500g
丝/苏蛋白激Plk1抗体包装1g
磷化丝/苏蛋白激Plk1抗体包装5g
亲环蛋白(亲环)PPIG抗体包装100g
磷化亲环蛋白(亲环)PPIG抗体包装25g
磷化蛋白激AKT底物1抗体包装25g
磷化腺衍生血管内皮生长因子抗体包装5g
富含脯的酪激2抗体包装1g
磷化富含脯的酪激2抗体包装1g
磷化富含脯的酪激2抗体包装25g
磷化丝/苏激p90RSK蛋白抗体包装5g
磷化丝/苏激p90RSK蛋白抗体包装1ml
磷化丝/苏激p90RSK蛋白抗体包装1g