详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
2×50ml | 1~3天 |
商品介绍:
用途: 软骨染色,主要显示羟基酸性粘液物质 注意事项: 主要由酸化液、Alcian 染色液(PH2.5)组成。染色结果为:酸性黏蛋白呈蓝色,细胞核呈浅蓝色。 储存条件:4℃,避光,12个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
(R型)人参皂苷Rh1(标准品)英文名称: Mevastatin透明质/玻璃抗体包装500g
(R型)人参皂苷Rh2英文名称: Mevastatin肝生长因子激活物抑制剂抗体包装25g
(S型)(标准品)英文名称: 6-Aminopenicillanic acidHA tag标签单克抗体包装5g
(S型)人参皂苷Rh2(标准品)英文名称: Asparaginase血红抗体包装1g
(S型)原人参三英文名称: N-Carbobenzyloxy-L-alanine戊型肝炎病抗体包装25g
(±)-柚皮(标准品)英文名称: Z-Gln-OH神经调节蛋白1抗体包装5g
1,2,3,4,6-O-没食子酰葡萄糖(标准品)英文名称: CBZ-L-Gly神经胶质生长因子/神经调节蛋白β抗体包装25g
1,2-O-Dilinoleoyl-3-O-β-D-g...英文名称: Proparacaine HCl组三聚体核苷结合蛋白1抗体包装5g
1,3-二咖啡???标准品)英文名称: Z-Ser-OH组蛋白去乙酰化3抗体包装100g
1,7-双-5-羟基-6-庚烯-3-英文名称: Z-Thr-OH高度发散同源异型盒蛋白抗体包装25g
1,8-桉叶英文名称: Z-β-Ala-OH腺病六邻体蛋白抗体包装5g
1-羟基-3,4,5-三氧山(标准品)英文名称: Z-Glu-OBzl高密度脂蛋白结合蛋白抗体包装100g
10-姜酚(标准品)英文名称: Z-Tyr-OH转录因子HNF-3α抗体包装25g
10-羟基癸(标准品)英文名称: Z-Tyr-OMe热休克蛋白β7抗体包装500g
10-羟基癸烯,10-HDA(标准品)英文名称: Amoxicillin sodiumE3连接抑制受体2抗体包装1g
金色横隔分裂链霉菌Streptomyces│aureosegmentosus 质量规格:含量测定磷脂爬行1试剂盒5-基糠;5-Methyl furf
冷海希瓦氏菌Shewanella│frigidimarina 质量规格:>99%,BR,可用于培养磷脂D2试剂盒芥子碱硫盐;Sinapine thi
ATCC21885资源名称: 谷棒杆菌 质量规格:HPLC>98%,标准品磷脂A2受体抗体试剂盒4-氧基;2-Hydroxy-4
软骨染色液(阿利新蓝法,pH2.5)Luteolibacter 椰子油氨基糖苷类-3-磷酸转移2Elisa
小叶相思根瘤 玉米油脱氢抗坏血Elisa
类诺卡氏属 玉米油还原型抗坏血酸Elisa
梭属 松油过氧化物Elisa
苏云金芽胞杆亚亚种 薰衣草油乙酸氧化Elisa
丛毛红曲 5- 羧基荧光二乙酸酯黑条矮缩病Elisa
东方伊萨酵母 N-Boc-N'-苄氧甲基-L-组氨酸α-L阿拉伯呋喃糖苷Elisa
酿酒酵母 1-丁基-3-甲基咪唑氯盐β半乳糖苷Elisa
蜡样芽孢杆 氯化1,3-二甲基咪唑β-淀粉Elisa
禽白血病病 4-正戊氧基苯乙炔酸性转化Elisa
淡紫青霉 4-戊基苯乙炔中性转化Elisa
印度芽孢杆 1-丁基-4-乙炔基苯乙二1Elisa
洋葱伯克霍尔德氏 Gly-DL-Asp多糖Elisa
绒毛栓 2-氨基-6-吡啶甲可溶性多糖Elisa
酮丁梭 3-溴-4-氟苯甲赤霉1Elisa