详细介绍
产品属性:
中文名称:碱性蛋白染色液(细胞专用)
英文名称:
产品规格:2×50ml
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
用途: 显示细胞中碱性蛋白,尤其是组蛋白 注意事项: 细胞核大部分被染成绿色。 储存条件:室温,避光,12个月 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
止泻木子(标准品)英文名称: H-Pyr-OH人内源性逆转录病膜糖蛋白2抗体包装5g
枳壳(标准品)英文名称: Z-Pyr-OHBeta基己糖苷beta亚基蛋白B链抗体包装1g
枳实(橙)(标准品)英文名称: DL-m-TyrosineHEXIM2蛋白抗体包装250mg
制何首乌(标准品)英文名称: H-Sar-OMe·HCl3'-5'外切1蛋白抗体包装10g
肿节风(草珊瑚)(标准品)英文名称: L-Isoleucinol型肝炎病NS5B抗体包装100g
重楼(云南重楼)(标准品)英文名称: L-Leucinol缺氧诱导基因1C蛋白抗体包装25g
重楼皂苷II(标准品)英文名称: Boc-LeucinolHEG同源蛋白1抗体包装500g
重楼皂苷I(标准品)英文名称: L-Phenylalaninol人肿瘤抑制蛋白抗体包装1g
重楼皂苷VII(标准品)英文名称: L-TryptophanolHemk基转移家族1号蛋白抗体包装5g
重楼皂苷VI(标准品)英文名称: Fmoc-ValinolHemk基转移家族2号蛋白抗体包装1g
珠子草(标准品)英文名称: D-ValinolHEN1基转移同源蛋白1抗体包装250mg
猪胆粉(标准品)英文名称: L-Phenylglycinol缺氧诱导基因2蛋白抗体包装5g
猪苓C英文名称: BOC-L-Prolinol乙肝病衣壳蛋白抗体包装25g
猪去氧胆(标准品)英文名称: 2-Amino-1,3-propanediol 型肝炎病1a基因型NS5蛋白抗体包装5g
猪牙皂(标准品)英文名称: N-Methyl-d-Aspartic Acid戊型肝炎病抗体包装50g
鲍曼/醋钙复合不动杆菌Acinetobacter│baunannii/calcoaceticus complex 质量规格:>98%,标准品流感B病试剂盒10-氧基;10-Methoxy
青霉属Penicillium│sp. 质量规格:>99%,BR流感B病试剂盒基丁香酚;Methyl eugenol
暂无Haematobacter│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品流感A病抗体IgG 巨豆三烯;Tabanone
碱性蛋白染色液(细胞专用)稻梨孢 香兰基丁羽状斑驳病Elisa
赤霉 Raloxifene HCl轻型黄边病Elisa
核黄德沃斯氏 盐酸喹那普利烯酰-CoA水合Elisa
豇豆慢生根瘤 Fmoc-L-4-苯氨酸淀粉Elisa
苏云金芽孢杆 2-氨基-6-溴嘌呤NAD-苹果酸Elisa
土壤伯克氏 1-O-癸基-β-D-麦芽糖苷NADP-苹果酸Elisa
黑曲霉 3-氯-5-甲氧基碳酸酐βElisa
亮白曲霉 3-甲基氨酸氨基转移Elisa
黄曲霉 4-(2-三氟氧基)天门冬氨酸氨基转移Elisa
黄色毛霉 (R,R)-(+)-双(α-甲苄基)盐酸盐L(+)-3-羟脂酰脱氢Elisa
小红酵母 基环三氧烷NADP-依赖苹果酸脱氢Elisa
香栓 2-氯-5-(三氟甲基)苯甲脱镁叶绿AElisa
少根根霉原变种 糖精钠 水合物7-羟基Elisa
芽孢杆 7,7-二氯二环[4.1.0]庚烷Elisa
枯草芽孢杆 3-溴4-氯苯苹果酸脱氢Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)