详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
英文名称:PF-06260933
产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
发货周期:1~3天
商品介绍:
PF-06260933是一种高度选择性的MAP4K4小分子抑制剂,在激酶实验和细胞实验中的IC50值分别为3.7和160nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1811510-56-1 纯度:99.69% 分子量:296.75 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
缺陷短波单胞菌磷化叉头蛋白家族1抗体Human ZNF395 ELISA Kit鸡烟酰腺嘌呤二核苷磷(NADPH)免疫试剂盒
微黄色芽孢杆菌叉头蛋白O4抗体Human ZNF311 ELISA Kit鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒
尖孢镰孢磷化叉头蛋白4抗体Human RBL1(Retinoblastoma-like protein 1) ELISA Kit鸡血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒
鸡伤寒沙门氏菌FMS样酪激3Human ZNF410 ELISA Kit鸡血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫试剂盒
腐皮镰刀菌(都只确定镰刀属)磷化FMS样酪激3Human ZNF397 ELISA Kit鸡血管内皮生长因子B(VEGF-B)免疫试剂盒
叶居菌磷化FMS样酪激3Human ZNF320 ELISA Kit鸡血管内皮生长因子A(VEGF-A)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化FMS样酪激3Human RBP1(Retinol-binding protein 1) ELISA Kit鸡血管紧张Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化FMS样酪激3Human ZNF326 ELISA Kit鸡血管紧张Ⅰ(ANG-Ⅰ)免疫试剂盒
冷纤维单胞菌磷化c-fos抗体Human ZNF323 ELISA Kit鸡新喋呤(NEOP)免疫试剂盒
根瘤菌磷化c-fos抗体Human ZNF320 ELISA Kit鸡新城疫病(NDV)抗体免疫试剂盒
盘长孢状盘孢磷化c-fos抗体Human ZNF323 ELISA Kit鸡维生H(VH)免疫试剂盒
三叶草根瘤菌缺氧诱导因子1α抑制蛋白抗体Human ZNF326 ELISA Kit鸡维生D结合蛋白(VDBP)免疫试剂盒
酿酒酵母肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(N端)Human ZNF24 ELISA Kit鸡褪黑(MT)免疫试剂盒
桦剥管菌补体因子H抗体Human ZNF251 ELISA Kit鸡透明质(HA)免疫试剂盒
放射形根瘤菌促卵泡激抗体Human ZNF256 ELISA Kit鸡铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒
细黄链霉菌神经元核抗原抗体Human ZNF253 ELISA Kit鸡天门冬基转移(AST)免疫试剂盒
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:分析标准品Hederacolchiside E
青霉属Penicillium│sp. 质量规格:分析标准品,>99.7%(GC)苦苏花皂苷C
鸡伤寒沙门氏菌Salmonella│gallinarum 质量规格:100mg/L,基体: 5%HNO3hederagenin 3-O-α-L-
MAP4K4抑制剂(PF-06260933)盐地芬尼多(标准品)英文名称: Neochlorogenic acid双特异性酪磷化调节激DYRK2抗体包装25g
盐地芬尼多杂质(烯化合物)(标准品)英文名称: Ivabradine HCl锌指结构蛋白20抗体包装5g
盐地美环;去基金霉(标准品)英文名称: XanthophyllC型凝集受体CLEC13A抗体包装25ml
盐地匹福林(标准品)英文名称: Xanthophyll双基精解2抗体包装5ml
盐地匹福林杂质A(标准品)英文名称: XanthophyllD酪激衰减蛋白1抗体包装100ml
盐?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Ticagrelor双特异性酪磷化调节激3抗体包装25ml
盐丁杂质(对丁基)(标准品)英文名称: Ticagrelor肌营养蛋白α抗体包装500ml
盐丁咯地尔(标准品)英文名称: Ramosetron HCl多巴β羟化抗体包装1g
盐(标准品)英文名称: Sevelamer HCl抑癌基因抗体包装250mg
盐度洛(标准品)英文名称: Sevelamer carbonateDNA基转移1抗体包装5g
盐多巴酚丁杂质(标准品)英文名称: NifuroxazideDNA基转移-3α抗体包装1g
盐多柔比星/盐阿霉(标准品)英文名称: NifuroxazideDNA基转移-3β抗体包装5g
盐(标准品)英文名称: Cepharanthine死亡受体3抗体包装5g
盐多沙普仑(标准品)英文名称: Cepharanthine死亡受体4抗体包装1g
盐多佐;盐杜塞酰(标准品)英文名称: Caspofungin Acetate精神分裂症易感基因抗体包装250mg