详细介绍
商品介绍:
用途: 尿沉渣染色检查 储存条件:室温,避光,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
50ml|100ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
野菊花(标准品)英文名称: D-Tyrosine磷化HER4抗体包装25g
野马追(标准品)英文名称: D-Histidine糖蛋白β-1B抗体包装500g
野马追内酯A(标准品)英文名称: D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride磷化热休克蛋白27抗体包装50mg
野马追内酯B(标准品)英文名称: D-Alanine tert-Butyl Ester HydrochlorideHEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体包装1g
野马追内酯K英文名称: D-Arginine人瘤病16型E7抗体包装5g
野牡丹(标准品)英文名称: ADMAHER2抗体包装1g
野木瓜(标准品)英文名称: N'-Nitro-D-arginine 人胎盘泌乳抗体包装5g
野漆树苷(标准品)英文名称: D-Asparagine monohydrate热休克蛋白27抗体包装25g
叶黄; 二羟基-d-胡萝卜(标准品)英文名称: D-Aspartic acid 高迁移率族蛋白A1抗体包装5g
叶(标准品)英文名称: D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester磷化HER2受体抗体包装1g
叶下珠(标准品)英文名称: D-Glutamic acid热休克蛋白-20抗体包装25g
夜香牛(标准品)英文名称: Nα-Tosyl-L-lysine chloromethyl ketone HCl淀粉抗体包装5g
一点红(标准品)英文名称: Glycyl-L-tyrosineA型流感病H1N1-M2蛋白抗体包装100g
一叶秋碱 ,一叶萩碱(标准品)英文名称: D-Leucine亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体包装25g
一枝黄花(标准品)英文名称: H-D-Lys-OH·HCl单纯疱疹病1型DNA聚合催化亚单位抗体包装5g
: HBUM171092资源名称: 链霉菌 质量规格:HPLC>98%,标准品硫脂抗体苦蒿;Blinin
秦氏蜜环菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 质量规格:>99%,BR硫氧还蛋白域包含蛋白6试剂盒可可碱;Theobromine
: Ye7231资源名称: 小肠结肠炎耶尔森氏菌 质量规格:>97%,USP,BR硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原,线粒体试剂盒咖啡乙酯;Ethyl caffeate
尿沉渣染色液(Sternheimer-Malbin法)白酒 乙酸乙酯、己酸乙酯 2-萘硫酚苹果酸Elisa
土地杆 N-BOC-4-基脯氨酸Elisa
阿氏埃希氏 5-乙酰基-2,3-二氢苯并[b]呋喃葡聚糖Elisa
溶血葡萄球 3-氯-5-氟苯甲葡萄糖-6-磷酸脱氢Elisa
解脂假丝酵母解脂变种 2-溴-6-甲酸葡萄糖6磷酸异构Elisa
芽胞杆 5氯-2甲氧基苯酸葡萄糖合Elisa
季也蒙假丝酵母 2,3,5-三-O-苄基-β-L-阿拉伯呋喃糖葡萄糖激Elisa
嗜冷海杆状 芴甲氧羰酰基-6-氨基己酸肉桂酸-4-羟化Elisa
秦氏蜜环 2,6-二溴-4-(三氟甲氧基)苯三磷酸腺苷Elisa
水生黄杆 4-溴-2-盐转运三磷酸腺苷抗体Elisa
鸭疫里氏杆 4-(羟甲基)苯甲渗调蛋白Elisa
平脐蠕孢 2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟酸盐水杨酸Elisa
大孢硬皮马勃 2-乙基-4-甲基咪唑水杨酸甲酯Elisa
枯草芽孢杆 3-溴噻吩-2-甲丝氨酸羟甲基转移Elisa
塔宾曲霉 戴斯-马丁试剂丝裂原激活的蛋白激;MAP激Elisa