详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
APY0201 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
APY0201是一种有效的PIKfyve抑制剂,抑制PtdIns3P转化为PtdIns(3,5)P2,IC50为5.2nM。APY0201还抑制IL-12/23产生。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1232221-74-7 纯度:98.56% 分子量:413.48 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
假黄单胞菌属癌胚抗原单克抗体(检测)Human CREB3L2 ELISA Kit山羊脑啡肽(ENK)免疫试剂盒
冻土毛霉癌基因c-Raf抗体Human CREST ELISA Kit山羊免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒
两歧双歧杆菌Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体Human CREB1 ELISA Kit山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒
球形节杆菌黑色瘤相关抗原抗体Human Claudin 7 ELISA Kit山羊免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒
黄孢紫红菇CD33抗体Human CREB3L2 ELISA Kit山羊粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫试剂盒
希瓦氏菌*睫状神经营养因子受体α抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊口蹄疫抗体(FMDV IgM)免疫试剂盒
酿酒酵母CD7抗体Human CKS2 ELISA Kit山羊(Cortisone)免疫试剂盒
果生链核盘菌尾型同源盒转录因子2抗体Human CEP44 ELISA Kit山羊抗利尿激/血管加压/精加压(ADH/VP/AVP)免疫试剂盒
短芽孢杆菌CD68抗体Human CEP55 ELISA Kit山羊结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒
东方伊萨酵母紧密连接蛋白1抗体Human CD94 ELISA Kit山羊碱性成纤维生长因子(bFGF)免疫试剂盒
尖孢镰刀菌膜辅蛋白抗体Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊甲状腺(T4)免疫试剂盒
委内瑞拉链霉菌CXC趋化因子16抗体Human CEP63 ELISA Kit山羊甲状旁腺激(PTH)免疫试剂盒
新疆盐地杆菌色c氧化IV亚型1抗体Human CEP350 ELISA Kit山羊黄体生成(LH)免疫试剂盒
球孢枝孢1号染色体开放阅读框227抗体Human CDC14B ELISA Kit山羊氧化(XOD)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌2号染色体开放阅读框71抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊还原型谷胱甘肽(GSH)免疫试剂盒
淡青链霉菌质膜微囊蛋白-1抗体Human CEP44 ELISA Kit山羊过氧化氢(CAT)免疫试剂盒
酵母菌Saccharomyces│sp. 质量规格:>98%,BRp物质试剂盒雷公藤次碱
木霉Trichoderma│sp. 质量规格:>98%,BRP钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白试剂盒罗汉松树脂酚
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BRProminin 2试剂盒雷公藤定碱
PIKfyve抑制剂(APY0201)马来阿扎他啶英文名称: LHRH (4-10)磷变位1抗体包装1g
马来非尼拉敏英文名称: Lymphocyte Activating Pentapeptide磷激1抗体包装5g
马来吡汀英文名称: Melittin(Mellitin)羧化抗体包装1g
马来伏沙明英文名称: Metamorphosin A脱氢复合物X蛋白抗体包装5g
马来那敏/扑尔敏英文名称: Neo-Kyotorphin磷烯羧激抗体包装100g
马来溴那敏英文名称: Neurokinin A (4-10)果糖-2,6-二磷1抗体包装25g
吗贝英文名称: Neuropeptide W-30 (human)磷化6磷果糖激抗体包装1g
美芬诺英文名称: Neuropeptide W-30 (rat)p21蛋白抗体包装5g
英文名称: Neurotensin (1-8)P选择糖蛋白配体1抗体包装25g
孟鲁司特钠英文名称: Neuropeptide Y (13-36)(porcine)丝蛋白2抗体包装5g
米尔贝肟英文名称: Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)蛋白调解因子10抗体包装10g
米拉贝英文名称: Neuropeptide Y (22-36)香叶烯基转移1β抗体包装1g
米屈肼英文名称: Neuropeptide Y (3-36)(porcine)胞浆蛋白LCP1抗体包装100g
莫吉司坦英文名称: Osteocalcin (7-19) (human)黑色瘤优先表达抗原抗体包装25g
奈福泮/盐平痛新英文名称: Osteogenic Growth Peptide原钙粘蛋白γA6抗体包装5g