详细介绍
商品介绍:
用途: 用于血小板计数 注意事项: 由草酸铵等组成。 储存条件:室温,12个月 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100ml | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
血竭高盐(标准品)英文名称: L-Cysteine methyl ester hydrochloride高密度脂蛋白抗体包装10MG
鸦胆子(标准品)英文名称: Glycine methyl ester hydrochloride蛋白激底物相关蛋白抗体包装5MG
鸦胆子苦(标准品)英文名称: L-Glutamic acid dimethyl ester hydrochloride艾滋病病抗体包装1g
鸦胆子D(标准品)英文名称: L-Leucine methyl ester hydrochloride流感病H3N2血凝抗体包装250mg
鸭脚树叶碱(标准品)英文名称: L-Phenylalanine methyl ester hydrochloride人瘤病16型L2抗体包装5g
鸭跖草(标准品)英文名称: L-Proline methyl ester hydrochlorideA型病H7N9 M1蛋白抗体包装1g
亚硫氢钠穿心莲内酯(标准品)英文名称: L-Serine methyl ester hydrochloride蛭抗体包装25g
亚麻木酚(标准品)英文名称: L-Tryptophan methyl ester hydrochloride副肿瘤综合症小脑变性相关蛋白抗体包装5g
烟碱(标准品)英文名称: L-Tyrosine methyl ester 植物热休克蛋白93抗体包装25g
延胡索(元胡)(标准品)英文名称: L-Cysteine ethyl ester hydrochloride重组人瘤病抗体包装5g
延胡索(标准品)英文名称: H-Phe-OEt.HCl长链烯脂酰脱氢抗体包装25g
延胡索乙;消旋延胡索乙(标准品)英文名称: Glycine ethyl ester hydrochloride羟脱氢β抗体包装5g
延龄草苷;地索苷(标准品)英文名称: L-Methionine ethyl ester hydrochloride三羟基三基裂解抗体包装1g
芫花(标准品)英文名称: L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride 高密度脂蛋白抗体包装250mg
芫花条(标准品)英文名称: L-Aspartic acid β-benzyl ester磷化三羟基三基还原抗体包装1g
硬结节杆菌Arthrobacter│scleromae 质量规格:>98%轮状病试剂盒柯伊利-7-O-葡萄糖苷;Chryso
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,叔丁盐形式轮状病试剂盒柯诺辛B;Corynoxine B
橙黄色粘球菌Myxococcus│xanthus 质量规格:>98%,USP卵清蛋白特异性IgG试剂盒柯诺辛;Corynoxine
血小板稀释液(计数液)青色糖单孢 3-氨基-2-萘甲酸二烯氧化物合Elisa
暗色节菱孢* 1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸酮酸激Elisa
豇豆慢生根瘤 羟钴盐酸盐査尔酮合Elisa
橙色杆状 维生B1超氧化物歧化Elisa
印度毛壳 磺异恶唑赤霉Elisa
草木樨中华根瘤 磺异恶唑赤霉3Elisa
牧草红酵母 2-氨基-4,5,6,7-四氢苯并[b]噻吩-3-羧酸单脱氢抗坏血酸还原Elisa
枯草芽孢杆 3,4,5-三氟胆色原脱氨Elisa
光滑青霉 3-(氯磺酰)-2-噻吩羧酸甲酯淀粉Elisa
土曲霉原变种 3-氯噻吩-2-羧酸独脚金内酯Elisa
秀珍菇 2-氨基-4-硝苯多氧化Elisa
耶尔森氏属 2-羟基-5-多酚氧化Elisa
肠道致病性大肠埃希氏 5-羧酸尿嘧啶多聚半乳糖酸Elisa
亚罗酵母属 氨酸丁酯二磷酸核酮糖羧化Elisa
金黄色葡萄球 氨酸丁酯二?;视虴lisa