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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
DiOC18(3) | 10mg | 1～3天 |
商品介绍：
本探针是常用的细胞膜荧光探针之一，呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料，进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱，仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO被激发后可以发出绿色的荧光，DiO和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中，大激发波长为484nm，大发射波长为501nm。 CAS：34215-57-1 分子式：C53H85ClN2O6 分子量：881.72 DiO可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF，溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热，并用超声处理以促进溶解。 DiO被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiO通常不会明显影响细胞的生存力(viability)。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI，有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。 DiO除了简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。 用于细胞膜荧光标记时，DiO的常用浓度为1-30μM，常用的浓度为5-10μM。DiO可以直接染色活的细胞或组织，染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚进行固定，使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。 注意事项：荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。 储存条件：4℃避光，有效期一年。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
无磷二氢钠（标准品）英文名称： Ambrisentan磷化D酪激衰减蛋白2抗体包装5g
无磷氢二钠（标准品）英文名称： Ambrisentan磷化D酪激衰减蛋白2抗体包装1g
无味霉A晶型（标准品）英文名称： Dronedarone HCL膀胱癌缺失基因1包装1g
无味霉B晶型（标准品）英文名称： Dronedarone磷化膀胱癌缺失基因1抗体包装1g
西吡铵（标准品）英文名称： Ranolazine HCl多巴受体D4抗体包装5g
西洛多辛(标准品)英文名称： Ranolazine HCl桥粒斑蛋白1抗体包装1g
西米替?。ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Lercanidipine HCl桥粒斑蛋白2抗体包装250mg
西尼地平(标准品)英文名称： Lercanidipine HCl多巴受体D5抗体包装5g
西沙必利（标准品）英文名称： Promethazine Hydrochloride脱氧尿嘧啶三磷核苷解抗体包装1g
西替利杂质A(1-[（4-）基]哌)（标准...英文名称： Agomelatine多巴受体D3抗体包装5g
昔萘沙美特罗（标准品）英文名称： Agomelatine诱捕受体3抗体包装1g
烯酰吗啉(标准品)英文名称： Piracetam多巴转运蛋白DAT抗体包装1g
腺嘌呤（标准品）英文名称： Ramelteon诱捕受体2抗体包装5g
腺嘌呤核苷（腺苷）（标准品）英文名称： Lacosamide肿瘤调亡/死亡受体5抗体包装1g
腺嘌呤盐盐(标准品)英文名称： Milnacipran 核心蛋白聚糖抗体包装5g
酵母菌Saccharomyces│sp. 质量规格：>99%,BR,可用于培养微管相关蛋白2试剂盒三白草;sauchinone
冻土毛霉Mucor│hiemalis 质量规格：HPLC>98%,标准品微管相关蛋白1A/1B轻链3B试剂盒2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鸢尾
青霉属Penicillium│sp. 质量规格：>99%,USP,BR,可用于培养微管相关蛋白1A/1B轻链3A试剂盒尚含鸡纳甙;Quinovin
细胞膜绿色荧光探针(DiO)宋内氏志贺氏51592 1-(2-甲氧基苯基)哌氢盐RAR相关孤儿受体γElisa
谢瓦曲霉 2'-溴-4'-氟乙酰苯二肽基肽ⅣElisa
*蜜环 对羟基苯丁酮抗磷脂IgG抗体Elisa
紫穗槐根瘤 2-羟基环戊烷羧酸甲酯抗磷脂IgM抗体Elisa
白地霉 3-甲氧苯白抗原FElisa
鲁氏不动杆 (R)-(+)-2-苄氧基酸流行性脑膜炎球抗体Elisa
绳状篮状 2,3,5-三氯3羧基4甲基5基2呋喃基Elisa
青霉 3-甲基苄人类嗜TⅠ型病IgG抗体Elisa
乳酸乳球乳脂亚种 4,5-二氯-2-甲基哒-3-酮干扰诱导蛋白44Elisa
球孢链霉高加索变种 地氯雷他定海藻糖Elisa
产氨短杆 N-甲基环己酪氨酸蛋白激受体ErbB3Elisa
运动发酵单胞 5-氮杂-3-甲CD33分子Elisa
杜擀氏 1,4,7,10-四氮杂环十二烷四盐酸盐外异蛋白AElisa
豌豆根瘤 1-溴-4,5-二氯-2-（易）核因子红2相关因子2Elisa
淡紫灰链霉 酸钠一水合物类固17α羟化Elisa
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