人脑静脉血管平滑肌原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人脑静脉血管平滑肌细胞分离自脑静脉组织；与脑动脉相比，脑静脉管壁较薄。与身体其他部位的静脉不同，脑静脉管壁中没有静脉瓣，静脉血的回流依赖高位的势能。脑静脉血的回流路径可以归纳为：大部脑静脉血经脑深部静脉和脑血窦流入颈内静脉；小部脑静脉血经眼部翼状静脉丛，进入静脉导血管再到头皮，后流入椎管中的椎旁静脉系统。脑静脉系统有大量交通枝静脉丛，即使两侧颈内静脉都被阻塞，大脑静脉血仍可经椎静脉和颈外静脉系统完成其回流。脑静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的人脑静脉平滑肌细胞采用蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人脑静脉血管平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

NCI-N87(人胃癌细胞)   小鼠真皮成纤维细胞   牛肾细胞;MDBK  CV-1细胞，非洲绿猴肾细胞 HPAC(人胰腺癌细胞) CM-H010人小气道上皮细胞CM-H027人淋巴成纤维细胞人结直肠腺癌细胞 兔原代脐静脉内皮细胞 小鼠原代骨髓单核细胞

BMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A 0.5mgBMPR-1A(Bone Morphogenetic protein Receptor-1A) 骨成型蛋白受体1A抗原

F13B Protein Human 重组人 Coagulation Factor XIII B chain / F13B 蛋白

SERPINB8重组小鼠 SerpinB8 蛋白 Protein

CD276 Protein Rat 重组大鼠 B7-H3 / CD276 蛋白

NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签) Protein

大鼠粒细胞趋化蛋白2(GCP2)试剂盒 ，英文名： GCP2 ELISA Kit

Monkey leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit白三烯C4(LTC4)试剂盒

RatCyclosporineA,CsAELISAKit 大鼠A(CsA)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGALELISAKit大鼠甘肽/甘素

细胞胱(cystine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次

ratProstaglandinF,PG-FELISAKit大鼠前列腺素F(PGF)试剂盒规格：96T/48T

小鼠转酶试剂盒   小鼠转酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠转酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠转酶试剂盒、小鼠转酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠基转移酶试剂盒   小鼠基转移酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠基转移酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠基转移酶试剂盒、小鼠基转移酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠表皮生长因子试剂盒   小鼠表皮生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠表皮生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠表皮生长因子试剂盒、小鼠表皮生长因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠棒状杆菌试剂盒   小鼠棒状杆菌试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠棒状杆菌试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠棒状杆菌试剂盒、小鼠棒状杆菌eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人脑静脉血管平滑肌原代细胞小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA 试剂盒

Human serine / threonine protein phosphatase (STK) ELISA Kit 人丝/苏蛋酸酶(STK)试剂盒

HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 人溶血补体(Hc)试剂盒 进口分装

Humanapoptosisinducingfactor,AIF试剂盒人凋亡诱导因子(AIF)试剂盒

植物叶片高质化叶绿体分离试剂盒10次

HumaissuePolypeptideAigen，TPAELISAKit人组织多肽抗原(TPA)试剂盒

TNFSF12重组大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签) Protein

ELK1 细胞转录因子ELK1抗原 0.5mgELK1 细胞转录因子ELK1抗原

GADD45A重组人 GADD45A / DDIT-1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

IGF1 Protein Human 重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白

PECAM1 Protein Mouse 重组小鼠 CD31 / PECAM-1 蛋白