人脉络膜黑色素原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 

人脉络膜黑色素细胞分离自眼球脉络膜组织；脉络膜在视网膜和巩膜之间，含有丰富血管和色素细胞，对外力冲击的耐受性较视网膜差，当眼球受到从前面来的外力的冲击作用通过玻璃体传到后极部时，坚硬的巩膜在其外面又有抵抗作用，使脉络膜在内外两种作用夹攻下而发生破裂和出血。脉络膜呈暗褐色，围绕视神经乳头部有照膜，为青绿色带金属光泽的三角形区。脉络膜是眼球中膜的后2/3处的薄膜，由纤维组织、小血管和毛细血管组成，软而薄，棕红色，在巩膜和视网膜之间，续连于睫状体后方。脉络膜的血循环营养视网膜外层，其含有的丰富色素起遮光暗房作用。主要功能是营养视网膜外层及玻璃体，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同时对视觉系统起?；ぷ饔?，对整个视觉神经有调节作用。续连于睫状体后方，含丰富的血管和色素细胞，有营养和遮光作用。

方法简介：

公司实验室分离的人脉络膜黑色素细胞先用蛋白酶消化、后蛋白酶-胶原酶混合消化结合专用培养基筛选法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人脉络膜黑色素细胞经Dopa染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

NCI-H23细胞，人非小细胞肺癌细胞 小鼠成纤维细胞,3T3NIH细胞 CM-R087大鼠软骨细胞T-47D人管癌细胞 T-47D human breast duct carcinoma cells DMEM+10%FBS  A-673细胞，横纹肌瘤细胞 Hela细胞 兔原代前列腺基底细胞 小鼠原代前列腺基底细胞

DIRAS3 Protein Human 重组人 ARHI / DIRAS3 蛋白 (Fc 标签)

NA重组甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神经酶 (Neuraminidase / NA) Protein

CD27 Protein Human 重组人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (His & Fc 标签)

NME1重组人 NME1 / NDKA 蛋白 Protein

大鼠淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)试剂盒 ，英文名： LFA1α ELISA Kit

Monkey ierleukin 2 receptor (IL-2R) ELISA Kit白介素2受体(IL-2R)试剂盒

RatLDL-ICELISAKit 大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGAP(HumanGTPaseactivatingprotein)ELISAKit人GTP酶活化蛋白

细胞骨架(肌动蛋白单体;G-ACTIN)红色荧光染色试剂盒10次

RatproteinkinaseB,PKBELISAKit大鼠蛋白激酶B(PKB)试剂盒规格：96T/48T

小鼠β细胞素(BTC)试剂盒   96T/48T

小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)试剂盒   96T/48T

小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)试剂盒   96T/48T

小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒   96T/48T

人脉络膜黑色素原代细胞小鼠红细胞生成素(EPO)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgMELISA Kit 大鼠0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM试剂盒

humahyroid-stimulatinghormonereceptoraibody,TSHRELISAKit 人促甲状腺激素受体抗体(TSHR)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-neuophilaibody,ANA试剂盒人抗中性粒细胞抗体(ANA)试剂盒规格：96T/48T

植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒(包括抗体)10次

humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲状腺素(u-T4)试剂盒规格：96T/48T

CSNK2A1重组小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

促生长激素释放激素(GHRH)重组蛋白 Recombinant Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)

LIF重组人 LIF 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重组人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 标签)

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 标签)