详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
100T | 1~3天 |
商品介绍:
用途: 凋亡细胞的形态学特征检测 注意事项: Hoechst33258是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Propidium Iodide简称PI,又称碘化丙啶,对人体有刺激性。 储存条件:-20℃,避光,12个月 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
牛蒡苷元(标准品)英文名称: Picloram促性腺释放激受体2抗体包装25g
牛蒡子(牛蒡子)(标准品)英文名称: PyrimethanilG蛋白偶联受体106抗体包装5g
牛蒡子苷(标准品)英文名称: PhenmediphamG0/G1期开关调节蛋白2抗体包装100g
牛蒡子苷元-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)英文名称: Metalaxyl solutionG蛋白偶联受体GPR162蛋白抗体包装25g
牛大力(美丽崖豆藤)(标准品)英文名称: Nitrapyrin锌指蛋白461抗体包装1g
牛胆粉(标准品)英文名称: ProfenofosG蛋白偶联受体109A抗体包装5g
牛耳枫(标准品)英文名称: PyriproxifenG激锚定蛋白1抗体包装1g
?;疲ū曜计罚┯⑽拿疲?/span> Phenthoate solutionDNA修复蛋白GIYD2抗体包装5g
牛磺鹅去氧胆(标准品)英文名称: Propanil solution生长抑制和分化相关蛋白抗体包装25g
牛膝(标准品)英文名称: Phosalone生发中心相关核蛋白MCM3抗体包装5g
牛至(标准品)英文名称: Propargite solution葡萄糖-6磷脱氢抗体包装25g
扭肚藤(标准品)英文名称: Plifenat solution眼发育相关基因蛋白ODAG抗体包装5g
女贞苷(标准品)英文名称: Plifenat solution特异性囊肿病液体蛋白15包装1g
女贞子(标准品)英文名称: Propamocarb特异性囊肿病液体蛋白15包装250mg
诺米林(标准品)英文名称: Cloquintocet-mexyl生长激释放因子受体抗体包装5g
施氏假单胞菌Pseudomonas│stutzeri 质量规格:HPLC>99%,标准品泡状过表达癌症促生存蛋白1试剂盒木香烃内酯;costunolide
金针菇杂19Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 质量规格:>98.5%,BR,可用于培养,一合物排序连接蛋白3试剂盒毛蕊异黄;Calycosin
紧密枝顶孢Acremonium│strictum 质量规格:HPLC>98%,标准品偶联因子6试剂盒毛蕊异黄苷;Calycosin-7-O
Hoechst33258/PI细胞凋亡染色试剂盒葡萄座腔 苯甲酰肟消退Elisa
球孢白僵 反-4-氨基环己甲酸甲酯盐酸盐CD31分子Elisa
副猪嗜血杆 1-丁基-2,3-二甲基咪唑氯盐CD105分子Elisa
苔藓隐球酵母 4-(氨基磺?;?苯酸碳酸酐6抗体Elisa
米曲霉疏展变种 7-硝基喹啉消退D1Elisa
冷杆属 (S)-(+)-1-基茚满,ChiPros,ee99+%富含脯氨酸的蛋白质14Elisa
猴头菇 3-氨基-2-羟基-5-溴吡啶线粒体融合2Elisa
忍冬黑痣 线粒体融合1Elisa
腐皮壳 (2S,3S)-1,2-环氧-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-苯丁烷Fission 1蛋白Elisa
酸杆属 9,10-二氢蒽水痘带状疱疹病Elisa
坟墓节杆 2-异丁基-4-甲基噻唑流行性腮腺炎病Elisa
动物双歧杆乳亚种 2-氨基蒽半胱氨酸丰富分泌蛋白3Elisa
核盘 苯肼-4-磺酸半水合物前列腺4Elisa
鸭疫里氏杆 乙酰乙酸对硝基苄酯骨髓基质抗原1Elisa
假单胞属 2-苄氧基-5-氯苯酸L-色酸Elisa