详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Hoechst33342 Staining Solution | 10ml | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
用途: 细胞周期分析、活细胞染色等 注意事项: Hoechst33342是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测??芍苯佑糜诠潭ㄏ赴蜃橹南赴巳旧?,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 储存条件:-20℃,避光,6个月 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
南沙参(标准品)英文名称: Triflumuron磷化GADD153抗体包装250mg
南山楂(标准品)英文名称: PencycuronG蛋白αS抗体(鸟嘌呤核苷结合蛋白Gα s)包装1g
南五味子(标准品)英文名称: Hexythiazox solutionG蛋白β4抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白β亚基4包装250mg
闹羊花II英文名称: Hexythiazox solutionG蛋白β2抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白β亚基2包装1g
闹羊花III英文名称: Imazalil solutionG蛋白γ2抗体/鸟嘌呤核苷结合蛋白γ2抗体包装5g
闹羊花V英文名称: Siduron磷化糖原合激3β抗体包装100g
闹洋花(标准品)英文名称: SimazineG蛋白偶联受体GPR92蛋白抗体包装25g
拟人参皂苷F11(标准品)英文名称: Simazine solution己糖6磷脱氢抗体包装500g
拟人参皂苷Rh2(标准品)英文名称: Phoxim solutionG蛋白偶联受体γ14抗体包装5g
拟人参皂苷RT5(标准品)英文名称: Phoxim solution肠高血糖相关肽抗体包装100g
鸟苷英文名称: Pirimicarb solution葡萄糖转运蛋白10抗体包装25g
尿囊(标准品)英文名称: Pyrazosulfuron肠高血糖相关肽抗体包装500g
柠檬苦,黄柏内酯(标准品,橙皮提取)英文名称: PretilachlorG蛋白偶联受体120抗体包装1g
柠檬苦;吴茱萸内酯(标准品,吴茱萸提取)英文名称: Pretilachlor solutionG蛋白偶联受体40抗体包装25g
牛白藤(标准品)英文名称: Propoxur solution20号染色体开放阅读框100抗体包装5g
克鲁弗酵母克鲁弗变种Saccharomyces│kluyveri var. kluyveri 质量规格:标准品,用于含量测定皮肤淋巴相关抗原试剂盒木犀草苷;Cynaroside
枯草芽孢杆菌枯草亚种Bacillus│subtilis subsp. subtilis 质量规格:>99%,JP16皮肤蛋白试剂盒迷迭香;Rosmarinic acid
: Yt17资源名称: 假丝酵母 质量规格:>98%,USP34,BR,可用于培养皮动蛋白试剂盒牡荆;Vitexin
Hoechst33342染色液(含封片剂)类干酪乳杆 乳清酸甲酯角蛋白18-3A9Elisa
长双歧杆 6-溴-2-羟血小板生成抗体Elisa
普通层褶 (Z)-3-甲基戊-2-烯-4-炔-1-丝氨酸;苏氨酸蛋白激1Elisa
香菇 2-甲硫基苯并噻唑水通道蛋白7Elisa
橄榄色毛壳 草酸镁水通道蛋白11Elisa
抗性微杆 双(1,5-环辛二烯)-三氟甲磺酸铑生长关联蛋白43Elisa
粉褶环柄菇 4-甲氧基间苯二接触蛋白4Elisa
枯草芽孢杆 2-糠酸乙酯CD166分子Elisa
巨兽芽孢杆 (S)-3-氨基丁脱氢1家族成员Elisa
假单胞属 1,1-环已基二乙酸单酰(CAM)幽门螺旋杆IgA抗体Elisa
枯草芽孢杆 2'-溴乙酰苯CD29分子Elisa
Nocardia 反-查耳酮三结构域包含蛋白72Elisa
枯草芽孢杆 盐酸普鲁可溶性糖蛋白ⅥElisa
多粘类芽孢杆 4-异氧基苯磺酰氯CD147分子Elisa
胶孢 2-氯喹唑啉碳酸酐6Elisa