详细介绍
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
产品属性:
英文名称:Hoechst33342 Staining Solution(1mg/ml)
产品规格:1ml|5×1ml
发货周期:1~3天
商品介绍:
用途: 细胞周期分析、活细胞染色等 注意事项: Hoechst33342是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 储存条件:-20℃,避光,12个月 |
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
木兰花碱(标准品)英文名称: 2-Ethyl-1-hexanol肿瘤转移抑制基因GDIA1抗体包装1g
木兰花碱(标准品)英文名称: 2-Ethyl-1,3-hexanediol肿瘤转移抑制基因GDIA2抗体包装5g
木兰脂(标准品)英文名称: Mesotrione胰高血糖抗体包装100g
木棉花(标准品)英文名称: Methyl decanoate线粒体甘油3磷?;瓶固灏?5g
木栓(标准品)英文名称: Methyl laurate磷脂酰基蛋白聚糖-6抗体包装1g
木通乙苷B;荷苞花苷B英文名称: Triticonazole磷二羟?;瓶固灏?50mg
木犀草苷(标准品)英文名称: Tsumacide solution囊性组织液体蛋白15抗体包装5g
木犀草-7-O-葡萄糖苷英文名称: Triforin磷化接头蛋白Gab2抗体包装25g
木犀草(标准品)英文名称: Triazophos通用转录因子2H肽1抗体包装5g
木香(标准品)英文名称: Tebufenozide甘油激抗体包装25g
木香烃内酯(标准品)英文名称: Tolclofos-methyl线粒体甘油三磷脱氢2抗体包装5g
苜蓿(标准品)英文名称: Thiosultap disodium谷酰合成/谷连接抗体包装250mg
耐斯糖;蔗果四糖三合物(标准品)英文名称: Triclopyr甘油三磷脱氢1抗体包装500mg
南板蓝根(标准品)英文名称: Temephos神经节苷酯抗体包装100mg
南鹤虱(标准品)英文名称: Trifluralin solutionS转移A3抗体包装1g
微黄八叠球菌Sarcina│subflava 质量规格:>99%皮质-3试剂盒马兜铃A;Aristolochic a
费氏中华根瘤菌Sinorhizobium│fredii 质量规格:纯度>99%皮质类固结合球蛋白试剂盒莫诺苷 ;Morroniside
: Fb56资源名称: 榆耳 质量规格:>95%,USP皮质试剂盒木兰花碱;Magnoflorine
Hoechst33342染色液(1mg/ml)乳酸计数质控样品 2,6-二氟钠盐Asc型氨基酸转运蛋白1Elisa
卷枝毛霉卷枝变型 5-氯-2-糠酸囊虫病IgG抗体Elisa
栖土曲霉 5-溴噻唑-4-甲酸乙酯白介8Elisa
白假丝酵母 4-氯吡啶-2-甲酰流行性脑脊髓膜炎病IgM抗体Elisa
芽孢杆属 2-氨基-5-溴噻唑-4-甲酸乙酯Janus激2Elisa
炭疽芽胞杆 2-氨基-6-氯苯并噻唑盐酸盐分拣蛋白1Elisa
拜氏梭 3-苯氧基-1-鸟苷酸环化Elisa
瓜类鞘氨单胞 2-甲基-4-酚酰基合成长链家族成员3Elisa
大肠埃希氏杆 吲唑-5-羧酸盐酸盐胶原Ⅳ型α1Elisa
假单胞属 5-甲酰水杨酸红膜蛋白抗体Elisa
米氏假单胞 三(2-基)膦连接黏附分子-AElisa
大肠埃希氏 2-甲氧基-6-甲酸四加半LIM域蛋白1Elisa
大肠埃希氏 L-香芹肾脏雄调节蛋白Elisa
球孢链霉黄色变种 2,5-二羟基-1,4-苯喹酮转录因子E2F2Elisa
棒曲霉 乙酰酮酸乙酯神经鞘磷脂Elisa