详细介绍
商品介绍:
用途: 细胞周期分析、活细胞染色等 注意事项: Hoechst33342是一种荧光染料,可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。染色染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测??芍苯佑糜诠潭ㄏ赴蜃橹南赴巳旧?,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 储存条件:-20℃,避光,6个月 |
产品属性:
中文名称:Hoechst33342染色液
英文名称:Hoechst33342 Staining Solution
产品规格:10ml|50ml
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
明党参(标准品)英文名称: Nonoic acid甘酰核苷合成抗体包装250mg
莫诺苷(标准品)英文名称: Naphthalene-d8生长休止特定蛋白2抗体包装1g
墨旱莲(标准品)英文名称: PentacosaneG蛋白γ11/Gγ11 抗体包装5g
母丁香(标准品)英文名称: 9,10-Dimethylanthracene磷化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体包装1g
牡丹皮(标准品)英文名称: 9,10-Diphenylanthraceneγ-谷酰转肽7重链抗体包装25g
牡丹皮苷C英文名称: Diphenyl sulfide生长激2/胎盘特异性生长激抗体包装5g
牡荆(标准品)英文名称: 4,4′-Diaminodiphenyl ether高尔基体相关蛋白GM130抗体包装25mL
牡荆-4''-O-葡萄糖苷英文名称: Docosane胃泌抑制肽受体抗体包装1g
牡荆葡萄糖苷(标准品)英文名称: 4,4'-Thiodianiline粒-巨噬集落激因子受体α抗体包装250mg
牡荆鼠李糖苷(标准品)英文名称: γ-Dodecalactone硫转移pi基因抗体包装5g
木鳖子(标准品)英文名称: Fenoxaprop-P接头蛋白Gab 2抗体包装5g
木芙蓉叶(标准品)英文名称: 6-Hydroxynicotinic Acid葡萄糖6磷α/G6Pase-α抗体包装1g
木瓜(标准品)英文名称: 1-Heptanol糖磷脂酰肌抗体包装5g
木蝴蝶苷A(标准品)英文名称: Indene乙二1抗体包装1g
木蝴蝶苷B(标准品)英文名称: Eicosane核呼吸因子2抗体包装250mg
副结核分枝杆菌Mycobacterium│paratuberculosis 质量规格:BR,来源猪胰脏脾脏酪激试剂盒木兰脂;magnolin
939=NCIMB10421=ATCC15442资源名称: 铜绿假单胞菌 质量规格:AR,>99%皮质抑/皮质稳定蛋白试剂盒马;Maackiain
: F2资源名称: 伤寒沙门氏菌 质量规格:进口原装,98%皮质/肾上腺试剂盒马兜铃 C ;Aristolochic
Hoechst33342染色液胶孢 乙脱氢Elisa
米氏假单胞 2-己基癸基-1-盐皮质Elisa
假单胞 6-氯-3H-苯并噻唑-2-酮膜联蛋白ⅡElisa
纤细白僵 3-氨基-4-氟血管内皮钙黏蛋白Elisa
艾比湖嗜盐碱红 2-基吡啶细螺旋体病IgM 抗体Elisa
苏云金芽孢杆 精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸转运体样蛋白4Elisa
Pseudomonas 5-溴噻吩-2-甲酸甲酯膜联蛋白XIElisa
庆丰链霉 间氨基乙酰苯盐酸盐细螺旋体病IgG抗体Elisa
Rummeliibacillus stabekisii 3-甲氧基-5-甲酸卵泡抑样蛋白1Elisa
黑木耳 D-亮氨酰甘氨酸甲型流感病IgG抗体Elisa
枯草芽孢杆 2-溴-1-甲氧基萘甲型流感病IgM抗体Elisa
华根霉 2-氨基-5-溴-4-羟基嘧啶乙型流感病IgG抗体Elisa
金黄色葡萄球* 顺式-3-己烯乳酸酯乙型流感病IgM抗体Elisa
杏鲍菇 3-异酸酯嗅2Elisa
铜绿假单胞(绿脓杆) (R)-(+)-2,2'-联[二-(4-基)膦基]-1,1'-联萘N-1-甲基烟酰Elisa