详细介绍
商品介绍:
产品特点: 1. 操作简单、染色稳定。 2. 适用范围广,可以用于各种石蜡组织切片的染色。 3. 本试剂盒至少可以染色100 张切片。 保存条件:常温,有效期一年。 |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Brown-Brenn Staining Kit | 100次 | 1~3天 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
骆驼蓬碱;骆驼蓬灵;哈梅灵(标准品)英文名称: Sulfaquinoxaline接头蛋白Gab 1抗体包装5g
骆驼篷子(标准品)英文名称: Sulfalozine sodium磷化糖原合激3α抗体包装25g
落花生枝叶(标准品)英文名称: Tiamulin磷化神经生长相关蛋白43抗体包装5g
落新妇苷(标准品)英文名称: Cesium iodide糖原合激-3β抗体包装100g
麻枫树酚B(标准品)英文名称: 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone抗粘附多肽抗体包装25g
(草)(标准品)英文名称: Dimethyl sulfoxide脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体包装500g
(中)(标准品)英文名称: Dodecyltrimethylammonium chloride神经膜糖蛋白M6a包装5g
根(标准品)英文名称: Methyl ArachidateG蛋白偶联受体101抗体包装250mg
麻醉椒苦英文名称: Polyamide胰高血糖样肽-1受体/GLP-1受体抗体包装1g
麻醉椒英文名称: Polyamide糖磷脂酰肌抗体包装5g
马鞭草(标准品)英文名称: Polyamide磷化gp130抗体包装25g
马勃(标准品)英文名称: Sodium phosphate dibasic dihydrateS转移ζ1抗体包装5g
马齿苋(标准品)英文名称: Sodium sulfate anhydrous甘-N-酰基转移抗体包装25g
马兜铃(北马兜铃)(标准品)英文名称: Sodium sulfate anhydrous甘-N-?;蒲?抗体包装5g
马兜铃A(标准品)英文名称: Sodium bicarbonate 转运蛋白G3PP抗体包装1g
青霉菌Penicillium│sp. 质量规格:>99%,BR,可用于培养 前动力蛋白1试剂盒白绵马AA;Albaspidin AA
宇佐美曲霉Aspergillus usamii 质量规格:>98%,标准品前病整合位点1试剂盒绵马ABA;Filixic acid
奇迹束丝放线菌Actinosynnema│mirum 质量规格:>900 mcg/mg,BR,可用于培养葡萄糖转运蛋白4试剂盒麻醉椒苫;methysticin
革兰氏菌染色鉴定试剂盒(Brown-Brenn)聚贪噬 1-乙基-3-甲基吡啶鎓乙磺酸盐狂犬病 IGMElisa
多形炭角* 3-甲氧基-5-三氟酸爱泼斯坦-巴尔病 IGMElisa
贝伦格葡萄座腔梨生专化型 6-溴-2,3-二氟苯基酸二氢尿嘧啶脱氢Elisa
单胞 2-氨基-3-溴-5-氟吡啶Klotho蛋白βElisa
坏损尾孢 1-氨基-3,6,9-三噁-11-十一8-羟基(脱氧)鸟嘌呤Elisa
氧化微杆 14-叠氮-3,6,9,12-四氧十四烷可溶性血管内皮生长因子受体2Elisa
微小毛霉 3,6-二氨基咔唑肌肉肌酸激Elisa
番茄枯萎病 柠檬酸二氢可溶性血小板膜糖蛋白ⅥElisa
拟青霉 (乙)[(2-联苯)二叔丁基膦]六氟锑酸金(I)雄酮Elisa
淡紫拟青霉 Benazepril HCl序列相似家族150成员AElisa
豇豆慢生根瘤 C5-18-全氟烷腺嘌呤核苷酸Elisa
尖孢镰刀 3-氯-2,6-二氟苯GFAP的降解产物Elisa
聚生壳 Fmoc-Phe-OPfpⅠ型质膜蛋白Elisa
黄瓜枯萎 Fmoc-Pro-OPfp脑膜炎奈瑟IgM抗体Elisa
枯草芽孢杆 Fmoc-Gly-OPfp活性氮簇Elisa